pcDNA3.1-MORC2重组质粒的构建及其在胃癌细胞SGC-7901中的表达和定位

作     者：刘芙蓉 刘彤 王春玉 李家滨 李丰 LIU Fu-rong;LIU Tong;WANG Chun-yu;LI Jia-bin;LI Feng

作者机构：中国医科大学细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001 

出 版 物：《解剖科学进展》 (Progress of Anatomical Sciences)

年 卷 期：2011年第17卷第3期

页      面：268-270,275页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.30370736 No.30570966) 教育部博士点基金资助项目(No.20050159023) 

主　　题：Microchidia2 转染 蛋白表达 胃癌 

摘      要：目的构建真核表达载体pcDNA3.1-MORC2并瞬时转染人胃癌细胞SGC-7901,观察融合蛋白在细胞内表达及定位。方法以人MORC2cDNA为模板,PCR扩增MORC2全长编码基因,亚克隆至pcDNA3.1-hisA表达载体。将构建的重组质粒测序并转染到胃癌细胞SGC-7901中,提取细胞蛋白进行Westernblot检测。用共聚焦激光扫描显微镜观察pcDNA3.1-MORC2在SGC-7901细胞内定位。结果 MORC2全长基因序列克隆到了表达载体pcDNA3.1-hisA中,酶切鉴定片段为3000bp。Westernblot检测到了融合蛋白pcDNA3.1-MORC2在胃癌细胞系SGC-7901中表达,分子量约为122kDa,主要定位于细胞核。结论成功构建了真核表达载体pcDNA3.1-MORC2,并检测到融合蛋白表达主要定位于胃癌细胞核内。