RNA干涉抑制NIH3T3细胞中外源PC-1基因表达

作     者：周立权 张惠 高雪松 王健 梁瑞霞 洪宝发 周建光 ZHOU Li-Quan;ZHANG Hui;GAO Xue-Song;WANG Jian;LIANG Rui-Xia;HONG Bao-Fa;ZHOU Jian-Guang

作者机构：军事医学科学院生物工程研究所北京100850 解放军总医院泌尿外科北京100853 

出 版 物：《军事医学科学院院刊》 (Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences)

年 卷 期：2005年第29卷第1期

页      面：45-48,68页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家"863"计划资助项目 (2002AA223061 ) 国家自然科学基金资助项目(30070296) 

主　　题：RNA干涉 PC—1基因 基因表达 前列腺肿瘤 

摘      要： 目的:获得能有效抑制PC 1基因表达的RNAi靶标,用RNAi技术研究PC- 1基因表达在前列腺癌中的作用。方法:用DNA重组技术构建了可表达短发夹RNA的重组质粒,将重组质粒与表达PC-1- EGFP融合蛋白的质粒共转染NIH3T3细胞,通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达差异,从 5个候选靶标中初筛出最合适的RNAi靶标,再通过RT- PCR和Western印迹从mRNA水平和蛋白质水平检测该RNAi靶标抑制PC- 1基因表达的效果。结果:利用RNA干涉有效靶点抑制了NIH3T3细胞中外源PC -1基因表达。结论:这一策略适合大量筛选RNAi有效靶标序列,其结果为研究RNAi技术降低PC 1基因的表达对前列腺癌细胞的影响奠定了基础。