载芬维A铵脂质体体外对恶性黑素瘤细胞增殖、凋亡和迁移的影响

作     者：崔艾丽 金哲虎 Cui Aili;Jin Zhehu

作者机构：延边大学附属医院皮肤科吉林省延吉市133000 

出 版 物：《中华皮肤科杂志》 (Chinese Journal of Dermatology)

年 卷 期：2018年第51卷第12期

页      面：879-884页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主　　题：黑色素瘤 实验性 芬维A铵 脂质体 细胞增殖 细胞凋亡 细胞运动 A375细胞 B16F10细胞 

摘      要：目的 探讨载芬维A铵脂质体(4-HPR-L)对A375及B16F10黑素瘤细胞增殖、凋亡和迁移的影响.方法 采用薄膜-超声分散法制备载4-HPR-L.体外分别培养A375及B16F10黑素瘤细胞,分为3组,空白对照组仅加入细胞和新鲜培养基,4-HPR组和4-HPR-L组分别加入同浓度4-HPR和4-HPR-L.细胞增殖抑制实验(CCK-8法)检测各组细胞增殖情况;Hoechst33258染色法和流式细胞仪检测细胞凋亡情况;细胞划痕实验检测细胞迁移能力;通过激光共聚焦显微镜观察4-HPR-L入胞情况.采用SPSS22.0软件进行统计分析,多组间数据比较采用单因素方差分析,两组间比较采用t检验.结果 4-HPR与4-HPR-L对A375和B16F10的增殖抑制作用均表现出浓度依赖,0.1、1、15、30、50、70 mg/L 4-HPR和4-HPR-L处理A375和B16F10细胞48 h后,4-HPR组A375细胞存活率分别为(94.3±1.4)%、(91.7±2.5)%、(84.4±2.5%)、(78.8±2.1)%、(59.0±1.1)%、(42.8±2.0)%,4-HPR-L组分另别为(86.0±0.2)%、(76.5±0.6)%、(60.9±1.5)%、(49.0±0.5)%、(32.9±0.2)%、(18.9±0.5)%,同浓度两组间比较,t值分别为8.019、8.298、11.455、19.978、33.672、16.314,均P0.01;4-HPR组B16F10细胞存活率分别是(95.4±1.9)%、(90.5±2.6)%、(77.0±0.8%)、(64.4±3.5)%、(59.1±2.9)%、(49.9±1.9)%,4-HPR-L组分另别是(88.4±2.0)%、(80.9±3.4)%、(60.9±2.2)%、(51.5±2.9)%、(41.1±1.2)%、(33.5±2.4)%,同浓度两组间比较,均P0.05.相同浓度下,4-HPR同浓度组A375和B16F10细胞存活率均高于4-HPR-L组.Hoechst33258染色显示,对照组、4-HPR组细胞无明显变化,而4-HPR-L组细胞体积变小,细胞质浓缩,细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体.流式细胞仪检测显示,4-HPR-L组A375和B16F10细胞凋亡率均显著高于4-HPR组,均P0.01.细胞划痕实验显示,4-HPR-L较4-HPR能更好地抑制细胞移行,显著降低划痕的愈合程度.激光共聚焦显微镜观察显示,C6脂质体入胞迅速.结论 4-HPR-L能更好地进入A375细胞、B16F10细胞,且能有效抑制A375、B16F10细胞的增殖和迁移,并诱导其凋亡.