内毒素／脂多糖通过PIM3对人中性粒细胞早期凋亡的作用

作     者：宋明明 李平 金新源 苏建东 孙炳伟 Song Mingming;Li Ping;Jin Xinyuan;Su Jiandong;Sun Bingwei

作者机构：南京医科大学附属苏州医院烧伤整形科215002 

出 版 物：《中华烧伤杂志》 (Chinese Journal of Burns)

年 卷 期：2018年第34卷第11期

页      面：809-814页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81471903) 江苏省社会发展重点项目(BE2017695) 苏州市医学重点学科基金(SZXK201511) 苏州科技发展计划(SYS2018086) 

主　　题：脓毒症 脂多糖类 细胞凋亡 中性粒细胞 PIM3 

摘      要：目的探讨内毒素／脂多糖（LPS）通过PIM3对人中性粒细胞早期凋亡的影响。方法采集1名健康成年志愿者静脉血，分离出中性粒细胞，采用随机数字表法分为对照组、LPS组、LPS＋PIM447组。对照组不行任何处理，LPS组采用1μLμg／mL的LPS刺激，LPS＋PIM447组在采用上述LPS刺激的前30min，用1μL终物质的量浓度为5μmol／L的PIM447预干预30min。常规培养1h后，采用流式细胞仪检测细胞早期凋亡率，二氢罗丹明123荧光探针法检测细胞的活性氧生成水平，蛋白质印迹法检测细胞内PIM3的表达水平。常规培养2h后，琼脂糖细胞趋化模型检测细胞趋化距离。以上4个实验每组样本数均为5。对数据行单因素方差分析、SNK检验。结果（1）LPS组细胞早期凋亡率[（0．891±0．012）％]与对照组[（1．351±0．183）％]相近（P〉0．05），LPS＋PIM447组细胞早期凋亡率[（82．057±0．121）％]明显高于LPS组（P〈0．01）。（2）LPS组细胞趋化距离[（984±5）μm]明显小于对照组[（2241±7）μm，P〈0．01]，LPS＋PIM447组细胞趋化距离[（1785±11）μm]明显大于LPS组（P〈0．05）。（3）LPS组细胞活性氧生成水平较对照组明显增加（P〈0．05），LPS＋PIM447组细胞活性氧生成水平较LPS组明显降低（P〈0．05）。（4）LPS组细胞PIM3表达水平（1．297±0．015）较对照组（0．789±0．021）明显增加（P〈0．05），LPS＋PIM447组细胞PIM3表达水平（0．731±0．011）较LPS组明显降低（P〈0．05）。结论LPS刺激可以降低人中性粒细胞的早期凋亡，使用PIM447预干预可以明显增加LPS刺激后中性粒细胞的早期凋亡，恢复趋化功能，且很好地抑制活性氧的产生，其机制可能与LPS促进PIM3的表达有关。