有机磷类杀虫剂对毒蕈碱乙酰胆碱M_2受体磷酸化的影响

作     者：邹黎明 李舒音 Carry Pope ZOU Li-ming;LI Su-yin;CARRY Pope

作者机构：沈阳医学院医学基础部生物化学与分子生物学教研室辽宁沈阳110034 Department of Physiological Sciences College of Veterinary Medicine Oklahoma State University Stillwater OK.USA 

出 版 物：《沈阳医学院学报》 (Journal of Shenyang Medical College)

年 卷 期：2005年第7卷第3期

页      面：148-151页

学科分类：0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 100207[医学-影像医学与核医学] 1006[医学-中西医结合] 1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 08[工学] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 100401[医学-流行病与卫生统计学] 100106[医学-放射医学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：美国NIH资助项目(Ro.ES009119) 

主　　题：有机磷杀虫剂 G蛋白结合受体激酶-2 毒蕈碱乙酰胆碱M2受体 磷酸化 毒蕈碱乙酰胆碱 有机磷类杀虫剂 M2受体 磷酸化 液体闪烁计数器 聚丙烯酰胺凝胶电泳 放射性标记 受体激酶 蛋白结合 

摘      要：目的:研究有机磷类杀虫剂(OPs)对G蛋白结合受体激酶-2(GRK2)介导的毒蕈碱乙酰胆碱M2受体磷酸化的影响,进一步揭示有机磷类杀虫剂可能存在的其他作用途径。方法:利用亲和层析方法从猪脑中纯化毒蕈碱乙酰胆碱M2受体;将纯化的毒蕈碱乙酰胆碱M2受体,G蛋白结合受体激酶-2,[γ-p32]标记的ATP与不同浓度的对氧磷(PO)、氧毒死蜱(CPO)共同保温,聚丙烯酰胺凝胶电泳,凝胶片干燥后放射性自显影检测M2受体磷酸化结果。之后将干燥凝胶片中放射性标记的磷酸化M2受体蛋白带剪下,同位素液体闪烁计数器计数。结果:氧毒死蜱(CPO)完全抑制毒蕈碱乙酰胆碱M2受体的磷酸化,其IC50为70μM;毒死蜱(CPF)也抑制M2受体的磷酸化,而对氧磷(PO)与对硫磷(parath ion)不抑制M2受体的磷酸化。结论:不同的OPs对GRK2介导的毒蕈碱乙酰胆碱M2受体的磷酸化有完全不同的作用;毒死蜱阻断M2受体的磷酸化,提示OPs的毒性作用存在其他的可能作用途径。