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细小病毒B19壳抗原VP2在大肠杆菌中的表达及血清学检测

The production of human parvovirus capsid proteins in Escherichia coli and its serological test

作     者:周为民 谷淑燕 ZHOU Wei-min,GU Shu-yan(Institute of Viral Disease Control and Prevention,China Center of Disease Control,Beijing100052,China)

作者机构:中国疾病预防与控制中心病毒病预防与控制所北京100052 

出 版 物:《生物技术通讯》 (Letters in Biotechnology)

年 卷 期:2002年第13卷第3期

页      面:176-178页

学科分类:1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

主  题:细小病毒B19 壳抗原 VP2 大鼠杆菌 表达 血清学检测 

摘      要:为了进行B19感染临床的血清学诊断,利用原核表达载体PQE31克隆和表达B19壳蛋白VP2,酶切鉴定PCR产物及PQE31-VP2克隆的正确性,Western-blot证明表达蛋白的特异性,并对其表达条件和纯化条件进行了优选。在D600为0.7,诱导时间为5h时表达量最高。Ni2+亲和色谱,用0.5mol/L咪唑洗脱液洗脱,获得纯化蛋白。利用纯化蛋白检测100份人群血清,免疫斑点法结果为阳性94例,阴性6例;ELISA结果为阳性84例,阴性16例,两种方法结果一致(0.25P0.1)。

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