融合蛋白表达过程中N末端蛋白对下游蛋白正确折叠的影响
Expression and Molecular Dynamics of Recombinant Ganoderma Lucidum Immunoregulatory Protein-IgG Fc (LZ8-Fc) Fusion Protein in Pichia pastoris作者机构:吉林大学药学院 理论化学计算国家重点实验室长春130021
出 版 物:《高等学校化学学报》 (Chemical Journal of Chinese Universities)
年 卷 期:2014年第35卷第2期
页 面:303-308页
核心收录:
学科分类:081704[工学-应用化学] 07[理学] 070304[理学-物理化学(含∶化学物理)] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 070303[理学-有机化学] 0703[理学-化学]
基 金:国家自然科学基金(批准号:81202446) 吉林省科技发展计划项目(批准号:20090941)~~
摘 要:将灵芝免疫调节蛋白(LZ-8)与免疫球蛋白G的Fc片段(IgG Fc)进行融合表达,通过Protein A亲和层析结合Superdex 75分子筛层析获得了高纯度LZ8-Fc.凝血活性实验结果表明,LZ-8与Fc融合表达在一定程度上影响了其免疫活性;利用分子动力学和圆二色光谱等技术研究了LZ8-Fc的蛋白折叠及组装方式,发现LZ8-Fc的组装方式与LZ-8相同,但是N末端的LZ-8可能影响下游IgG Fc片段的正确折叠,表明在融合蛋白制备过程中,位于N末端的蛋白对下游蛋白的正确折叠起到重要作用,这为融合蛋白制备技术的优化及应用过程中的稳定提供了重要的理论依据.