水生动物副溶血弧菌、霍乱弧菌的PCR同步检测方法

作     者：张晓君 白雪松 毕可然 周宝芸 秦蕾 阎斌伦 秦国民 ZHANG Xiao-jun;BAI Xue-song;BI Ke-ran;ZHOU Bao-yun;QIN Lei;YAN Bin-lun;QIN Guo-min

作者机构：淮海工学院海洋学院江苏省海洋生物技术重点建设实验室江苏省海洋开发研究院江苏连云港222005 

出 版 物：《水产科学》 (Fisheries Science)

年 卷 期：2013年第32卷第7期

页      面：412-415页

学科分类：0908[农学-水产] 09[农学] 

基　　金：江苏省水产三项工程项目(DY2012-3-7,PJ2010-58) 连云港市科技攻关项目(CG1134) 中央财政支持地方高校发展专项资金项目(CXTD16) 2011江苏高校优势学科建设工程项目 

主　　题：副溶血弧菌 霍乱弧菌 toxR基因 lolB基因 同步PCR 

摘      要：副溶血弧菌和霍乱弧菌((non-O1/non-O139型),不仅对水产动物具有广泛和强的致病作用,而且危害人类的健康,是人和水产动物共患病的病原菌。以副溶血弧菌的toxR基因及霍乱弧菌的lolB基因设计2对引物,建立了副溶血弧菌和霍乱弧菌的PCR同步检测方法,相应的扩增目的片段分别为368bp和519bp。在PCR反应体系中副溶血弧菌和霍乱弧菌可扩增出目的基因片段,5株对照菌无任何扩增条带,表明所建立的双重PCR检测方法特异性较强,且所设计的2对引物间无交叉干扰现象;灵敏性试验结果表明,副溶血弧菌的检测最低限1.75×102 cfu/mL,霍乱弧菌的检测最低限1.25×102 cfu/mL,具有较好的灵敏性;人工染菌水产品检测结果显示,人工染菌的8种水产品均为阳性检测结果,而未染菌组均为阴性。本试验建立的双重PCR法特异性强、灵敏性高,可用于副溶血弧菌和霍乱弧菌引起的水产动物疾病的诊断及水产品的安全检测。