利用N-端融合(His)_6标签观察家蚕核型多角体病毒泛素蛋白的亚细胞定位
The Employment of (His)_6 Tag to Analyze the Subcellular Localization of Ubiquitin Encoded by the Bombyx mori Nucleopolyhedrovirus作者机构:江苏大学生命科学研究院江苏镇江212013 中国农业科学院蚕业研究所江苏镇江212018
出 版 物:《蚕业科学》 (ACTA SERICOLOGICA SINICA)
年 卷 期:2010年第36卷第6期
页 面:944-948页
基 金:中国博士后科学基金项目(No.20100471387) 江苏省高校自然科学基础项目(No.07KJB180013) 江苏大学高级人才基金项目(No.05JDG048)
主 题:家蚕核型多角体病毒 泛素 (His)标签 亚细胞定位
摘 要:为了给家蚕核型多角体病毒(BmNPV)泛素蛋白(UB)的功能研究提供亚细胞定位信息,利用Red重组系统和BmN-PV的bacmid系统,进行2次同源重组,成功地将(His)6标签编码序列引入到BmNPV泛素基因(ub)起始密码子ATG和第2个密码子CAA之间,使得表达的BmNPV UB的N-端融合(His)6标签。通过对(His)6的免疫荧光分析观察到BmNPV UB在BmN细胞中呈现3种方式的亚细胞定位:均匀地分布于整个细胞;主要分布于细胞核;分布于细胞核,同时在细胞质中出现零星的点分布。BmNPV UB具有多种不同的亚细胞定位方式,提示其功能的多样性。