基于单波长激发的定量FRET成像

作     者：魏丽春 苏文华 陈同生 WEI Lichun;SU Wenhua;CHEN Tongsheng

作者机构：华南师范大学生物光子学研究院激光生命科学研究所暨激光生命科学教育部重点实验室广东广州510631 

出 版 物：《激光生物学报》 (Acta Laser Biology Sinica)

年 卷 期：2018年第27卷第4期

页      面：326-331页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071009[理学-细胞生物学] 09[农学] 0901[农学-作物学] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金(6152782 81471699) 

主　　题：定量FRET成像 FRET探针 单波长激发 实时测量 活细胞 

摘      要：本文发展了一种针对于固定FRET质粒的单波长激发的E-FRET方法(SDW-E-FRET)。相比于EFRET方法,SDW-E-FRET只需要测量供体激发时供体通道的荧光强度(IDD)和FRET通道的荧光强度(IDA),因此该方法可以实现活细胞的快速定量FRET成像。结合双通道荧光显微成像系统,该方法无需任何机械切换,定量FRET成像的速度只取决于CCD相机的成像速度,因而特别适合活细胞实时动态定量FRET成像。在本研究小组发展的双通道荧光显微镜平台上,应用SDW-E-FRET方法测量了C5V和C17V的FRET效率,得到了与其它方法测量的一致的结果。