猪蓝耳病病毒RT-LAMP快速可视化检测方法的建立

作     者：邓显文 谢芝勋 谢志勤 刘加波 庞耀珊 谢丽基 范晴 罗思思 黄秀琴 

作者机构：广西兽医研究所广西畜禽疫苗新技术重点实验室南宁530001 

出 版 物：《基因组学与应用生物学》 (Genomics and Applied Biology)

年 卷 期：2014年第33卷第2期

页      面：331-336页

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：广西特聘专家专项(2011B020) 国家百千万人才工程人选专项(945200603) 广西科技重大专项(1222003-2-4)共同资助 

主　　题：猪蓝耳病病毒 RT-LAMP 检测 

摘      要：为建立能快速检测猪蓝耳病病毒(PRRSV)的检测方法,本研究根据基因库中PRRSV非结构蛋白NSP2基因的保守序列,设计了一套特异性环介导等温扩增(RT-LAMP)引物,建立了PRRSV的RT-LAMP可视化检测方法。该方法的敏感性可达10 copies RNA,高于常规PCR方法 10倍;全部反应可以在50 min内完成;可通过肉眼观察钙黄绿素(calcein)颜色变化直接判定结果;对其它常见病原体的检测结果均为阴性,同时应用实时浊度仪对反应体系浊度及浊度的变化速率进行实时测量,结果相一致。结果表明建立的RT-LAMP方法简便、快速、灵敏、特异,可用于PRRSV感染的快速检测。