Pannexin1,2在小鼠睾丸癌I-10细胞和睾丸间质细胞TM3中的表达及通道功能调控

作     者：刘号峰 董淑英 苑敏 王雪如 武丹丹 范威振 童旭辉 LIU Hao-feng;DONG Shu-ying;YUAN Min;WANG Xue-ru;WU Dan-dan;FAN Wei-zhen;TONG Xu-hui

作者机构：蚌埠医学院药学院药理学教研室安徽蚌埠233030 

出 版 物：《中华男科学杂志》 (National Journal of Andrology)

年 卷 期：2018年第24卷第9期

页      面：776-781页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：高校优秀青年人才支持计划重点项目(gxyq ZD2016158) 蚌埠医学院研究生科研创新计划项目(byycx1711) 蚌埠医学院大学生创新训练项目(201710367007)~~ 

主　　题：泛连接蛋白通道 ATP 甘珀酸 丙磺舒 小鼠 

摘      要：目的:探讨泛连接蛋白(Panx)蛋白在小鼠睾丸癌I-10细胞与睾丸间质细胞TM3中的表达水平及其功能调控。方法:Western印迹法检测Panx-1和Panx-2蛋白在睾丸癌细胞中的表达水平;使用Panx通道抑制剂100μmol/L的甘珀酸(CBX)、200μmol/L的丙磺舒(PBN)作用于I-10细胞后,采用实时荧光法检测细胞间荧光传递能力;化学发光法检测细胞外ATP浓度;分别干扰(shRNA)和过表达(m Panx-1) Panx-1基因,调控Panx-1蛋白的表达及功能。结果:Western印迹结果显示,与TM3细胞相比,I-10细胞中Panx-1和Panx-2的表达量分别增加(289. 5±55. 8)%(P 0. 05)和(264. 5±24. 6)%(P 0. 05);采用CBX和PBN处理后,实时荧光实验和化学发光法结果显示,与对照组相比,CBX组和PBN组平均荧光物质转运量下降(87. 5±17. 7)%和(89. 3±14. 3)%(P0. 01),细胞外ATP水平在8、16、24 h时分别下降(57. 3±7. 2)%、(56. 4±9. 6)%,(63. 4±6. 4)%、(61. 7±2. 5)%,(35. 8±1. 6)%、(13. 5±8. 3)%(P 0. 01); shRNA和m Panx-1处理后,Western印迹结果显示,与阴性对照组相比,shRNA1和shRNA2组中Panx-1的表达量下降(38. 3±5. 2)%和(31. 8±5. 1)%(P 0. 01),m Panx-1组Panx-1的表达量增加(128. 4±7. 5)%(P 0. 01),且实时荧光实验和化学发光法结果显示,shRNA组荧光物质转运量下降(72. 4±39. 4)%(P 0. 01)和细胞外ATP含量在8、16、24 h分别下降(14. 7±0. 1)%、(13. 7±0. 3)%、(13. 1±0. 3)%(P 0. 01); m Panx-1组荧光物质转运量增加(122. 5±. 17. 1)%(P 0. 01)和细胞外ATP含量在8、16、24 h分别增加(886. 1±82. 1)%、(885. 8±83. 3)%、(841. 5±21. 8)%(P 0. 01)。结论:Panx-1和Panx-2在小鼠睾丸癌I-10细胞中表达增多,CBX和PBN及shRNA抑制Panx通道后,睾丸癌I-10细胞荧光传递能力减弱和细胞外ATP水平下降。