肝片吸虫组织蛋白酶L真核表达载体构建及重组蛋白活性分析

作     者：闻晓波 冉旭华 王春仁 宋佰芬 魏晓曼 李晓娟 王密 苗艳 WEN Xiao-bo;RAN Xu-hua;WANG Chun-ren;SONG Bai-fen;WEI Xiao-man;LI Xiao-juan;WANG Mi;MIAO Yan

作者机构：黑龙江八一农垦大学动物科技学院大庆163319 

出 版 物：《中国人兽共患病学报》 (Chinese Journal of Zoonoses)

年 卷 期：2013年第29卷第1期

页      面：51-53,58页

核心收录：

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：黑龙江省教育厅青年骨干项目(No.1251G042) 黑龙江省科技计划项目(GZ11B208)联合资助~~ 

主　　题：肝片吸虫 catL基因 真核表达 活性分析 

摘      要：目的构建肝片吸虫组织蛋白酶L(CatL)的真核表达载体,研究重组蛋白的生物学活性。方法以构建好的重组质粒pET30a-FhCatL为模板,利用PCR技术扩增肝片吸虫组织蛋白酶L基因(catL),连接真核表达载体pEGFP-N1,构建重组质粒pEGFP-N1-CatL,转染HeLa细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光,Western blotting检测重组蛋白表达情况。结果重组质粒pEGFP-N1-CatL在HeLa细胞中获得了表达,Western blotting结果表明真核表达质粒表达的重组蛋白能与自然感染肝片吸虫的山羊阳性血清发生特异性反应。结论肝片吸虫CatL真核表达载体构建成功,真核表达产物可与自然感染的山羊阳性血清发生特异性反应,具有免疫反应性,可做为分子疫苗的候选和诊断抗原进行进一步的研究。