miRNA-93对结肠癌HT-29细胞株化疗敏感性的影响

作     者：苏超云 施奕君 刘丹 魏庆忠 SU Chaoyun;SHI Yijun;LIU Dan;WEI Qingzhong

作者机构：北京航天总医院普外科北京100076 首都医科大学附属北京同仁医院肿瘤中心100176 北京大学前沿交叉学科研究院生命科学联合中心100871 

出 版 物：《临床肿瘤学杂志》 (Chinese Clinical Oncology)

年 卷 期：2018年第23卷第9期

页      面：795-800页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主　　题：结肠癌 微小核糖核酸 5-FU 敏感性 PTEN 

摘      要：目的探讨miR-93与结肠癌HT-29细胞株对氟尿嘧啶(5-FU)敏感性的影响及可能机制。方法 miR-93抑制物转染HT-29细胞,同时设置空白对照组和阴性对照组(NC),采用MTT法检测细胞增殖活性。流式细胞术、Transwell细胞侵袭实验和划痕实验分别检测miR-93抑制物组、空白对照组和NC组HT-29细胞凋亡、侵袭和迁移。双荧光素酶报告实验验证PTEN与miR-93的关系。采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测3组细胞miR-93表达,以及对p-VEGFR2、p-Akt、PTEN m RNA表达的影响。结果 miR-93抑制物组中miR-93的相对表达量为0. 40±0. 05,显著低于空白对照组和NC组的1. 13±0. 08、1. 12±0. 09,差异有统计学意义(P0. 05)。经1、4、16、64、256μg/ml的5-FU处理后,miR-93抑制物组HT-29细胞的增殖抑制率高于同浓度下NC组和空白对照组,差异有统计学意义(P0. 05)。经16μg/ml 5-FU处理后,miR-93抑制物组HT-29细胞凋亡率、侵袭率和愈合率分别为(52. 75±7. 44)%、(45. 76±15. 85)%、(12. 64±3. 29)%,与空白对照组和NC组比较,差异有统计学意义(P0. 05)。双荧光素酶报告实验分析PTEN可能是miR-93的下游靶基因。miR-93抑制物组p-VEGFR2、pAkt和PTEN表达水平分别为1. 28±0. 09、0. 85±0. 08、1. 22±0. 09,与空白对照组和NC组比较,VEGFR2和Akt磷酸化水平下调,PTEN表达上调。结论下调miR-93可以增加PTEN的表达,抑制VEGFR-2和Akt磷酸化水平,从而提高结肠癌细胞对5-FU的敏感性。