氧化还原状态的改变控制手霉素诱导HL-60白血病细胞凋亡

作     者：佘妙容 郭坤元 牛新清 卢晓珣 涂三芳 SHE Miao-rong;GUO Kun-yuan;NIU Xin-qing;LU Xiao-xun;TU San-fang

作者机构：南方医科大学珠江医院血液内科广东广州510282 

出 版 物：《中国药理学通报》 (Chinese Pharmacological Bulletin)

年 卷 期：2008年第24卷第6期

页      面：772-777页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 10[医学] 

基　　金：广东省自然科学基金资助项目(No7001196) 广东省医学科研基金资助项目(NoA2006020) 

主　　题：白血病 凋亡 手霉素 反应性氧基 一氧化氮 超氧 阴离子 线粒体 超氧歧化酶 

摘      要：目的研究手霉素对HL-60白血病细胞的作用,探讨其作用机制,主要是线粒体的改变。方法使用人的白血病细胞株HL-60细胞。MTT细胞毒性测定评价对白血病细胞的作用,使用Annexin V和一氧化氮(nitric oxide,NO)染料标记细胞,应用流式细胞仪术检测细胞内NO生成和细胞凋亡。细胞内超氧阴离子通过二氢乙啶(dihydroethidium,DHE)测定。应用化学发光法测定超氧歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性。采用荧光法测定谷胱甘肽(glutathi-one,GSH),萤光素-萤光素酶发光法测定ATP含量。免疫印迹技术检测细胞色素C和Mn-SOD的表达。结果手霉素引起HL-60细胞活性的下降,且呈剂量依赖性。手霉素诱导产生反应性氧基(reactive oxygen species,ROS):NO和超氧阴离子,降低GSH,但不影响SOD。手霉素诱导线粒体降低细胞ATP的含量,线粒体肿胀和细胞色素C从线粒体释放到细胞质。手霉素诱导的凋亡与ROS的增加有关。用N-乙酰基-L-半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)抑制ROS可保护HL-60细胞逃避手霉素的细胞毒作用和避免手霉素诱导的凋亡。结论细胞内ROS的产生对手霉素的细胞毒作用起非常重要的作用。手霉素通过包括上游ROS产生,线粒体形态改变和细胞色素C释放的线粒体途径,诱导白血病细胞凋亡。