中山病多克隆抗体竞争ELISA检测方法的建立

作     者：杨振兴 朱建波 肖雷 高林 苗海生 何于雯 谢佳芮 杨恒 李华春 YANG Zhen-xing;ZHU Jian-bo;XIAO Lei;GAO Lin;MIAO Hai-sheng;HE Yu-wen;XIE Jia-rui;YANG Heng;LI Hua-chun

作者机构：云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室云南昆明650224 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2018年第40卷第7期

页      面：601-606页

核心收录：

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：基础研究计划青年项目(2016FD002) 国家重点研发计划(2016YFD0500908) 国家公益性行业(农业)科研专项(201303035) 

主　　题：中山病病毒 多克隆抗体 竞争ELISA 

摘      要：为建立一种简便、快速的中山病血清抗体监测方法,本研究采用纯化的中山病病毒(CHUV)包被ELISA反应板,兔抗CHUV多克隆抗体作为竞争抗体,建立了检测CHUV抗体的竞争ELISA(C-ELISA)方法。结果显示:抗原最佳包被浓度为4.12μg/m L,竞争抗体最佳使用浓度为1∶12 000倍。特异性试验显示该C-ELISA方法仅能检测CHUV抗体,其它相关病毒阳性血清检测结果均为阴性。对已知阳性样品的检测结果表明,本研究建立的C-ELISA方法敏感性高于血清中和试验和琼脂扩散试验。分别用C-ELISA、RT-PCR和病毒分离试验对监控动物每周采集的血清和抗凝血样品进行检测,ELISA结果与其它两种方法检测结果对应一致。本研究建立的C-ELISA为CHUV抗体的检测提供了一种快速、方便、可靠的方法。