14-3-3蛋白多克隆抗体的制备和应用

作     者：张福萍 董小平 孙宪锋 周伟 赵同兴 洪涛 

作者机构：中国预防医学科学院病毒学研究所北京100052 

出 版 物：《中华神经科杂志》 (Chinese Journal of Neurology)

年 卷 期：2000年第33卷第5期

页      面：302-304页

核心收录：

学科分类：1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 100401[医学-流行病与卫生统计学] 10[医学] 

基　　金：国家 8 6 3高科技发展计划项目! (86 3 10 2 11 0 3 0 5 ) 

主　　题：蛋白类 朊病毒病 脑脊髓液 多克隆抗体 制备 应用 

摘      要：目的 制备 14 3 3特异性抗体并试用于朊病毒病患者脑脊液标本检测。方法 以原核细胞表达的谷光甘肽 S 转移酶 (GST) 14 3 3蛋白为抗原 ,免疫家兔。用酶联免疫吸附测定法(ELISA)及Westernblot方法检测制备的抗血清效价和特异性。结果 ELISA检测显示所制备的抗体与纯化的GST 14 3 3蛋白反应效价为 1∶40 96 0 0 0 ;Westernblot结果证实所制备的抗体可有效识别原核细胞表达的及脑组织提取物中存在的 14 3 3蛋白。对 2例具有较为典型脑电图改变、临床可疑诊断为克罗伊茨费尔特 雅各布病 (Creutsfeldt Jacobdisease,CJD)病人的脑脊液检测发现其 14 3 3蛋白为阳性 ;另外 4例伴有痴呆、昏迷症状病人脑脊液 14 3 3蛋白为阴性 ,其中 3例进行的脑组织活检显示致病性朊蛋白 (PrPSc)阴性 ,无典型CJD病理改变 ;其余 2 4例无痴呆症状的脑炎及脑病病人脑脊液 14 3 3蛋白均为阴性。以上结果与用标准 14 3 3抗体所获结果完全吻合。结论 利用原核细胞表达的GST 14 3 3蛋白可有效地诱导免疫动物产生特异性抗体 ,所制备的抗体可用于CJD病人脑脊液 14 3 3蛋白的检测。