重组亚甲基四氢叶酸还原酶代谢工程菌发酵工艺的优化

作     者：邵飞 卞筱泓 阙哲夫 许激扬 尤晓清 赵玉成 刘为营 

作者机构：中国药科大学生物化学教研室南京210009 

出 版 物：《中国药学杂志》 (Chinese Pharmaceutical Journal)

年 卷 期：2013年第48卷第21期

页      面：1808-1814页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1002[医学-临床医学] 10[医学] 

基　　金：中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(JKQ2011046) 

主　　题：亚甲基四氢叶酸还原酶 代谢工程 L-5-甲基四氢叶酸 发酵工艺 

摘      要：目的优化重组亚甲基四氢叶酸还原酶代谢工程细菌株的发酵工艺,以提高此菌株中L-5-甲基四氢叶酸的累积量。方法通过单因素实验和正交实验研究此菌株的最优发酵工艺。结果此菌株的最优发酵工艺为:蔗糖为3%,酵母浸粉为1.0%,无机盐为NaCl-K2HPO4-MgSO4(1.26%∶0.42%∶0.02%),磷酸二氢铵为1.0%,接种量为5%,初始pH为7.5,诱导时机为2.5 h,诱导剂浓度为1.4 mmol·L-1,诱导温度为37℃,诱导时间为6 h,诱导剂添加次数为2次。优化后与优化前相比,此菌株的细菌生长量提高了36.4%,亚甲基四氢叶酸还原酶比活力提高了46.8%,L-5-甲基四氢叶酸的累积量提高了66.1%。结论本实验为此菌株的发酵罐中试放大提供了实验依据。