9型重组腺相关病毒转染microRNA-21前体在大鼠心肌的转染效率及安全性
The transfection efficiency and safety of recombinant adeno-associated virus serotype 9 transducing microRNA-21 precursor in rat myocardium作者机构:中南大学湘雅三医院心内科湖南长沙410013 广州医学院第三附属医院心内科广东广州510150
出 版 物:《中国现代医学杂志》 (China Journal of Modern Medicine)
年 卷 期:2013年第23卷第9期
页 面:13-17页
学科分类:1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学]
主 题:腺相关病毒 9型重组腺相关病毒 microRNA-21 转染效率
摘 要:目的研究含荧光标记ZsGreen的9型重组腺相关病毒(rAAV9)转染目的基因microRNA-21前体(pre-miR-21)至大鼠心肌的转染效率、表达时间及安全性。方法用冠脉注射方法转染PBS及rAAV9-Zs-Green-pre-miR-21 1.0×1010vg/只、1.0×1011vg/只、1.0×1012vg/只至SD大鼠心肌,倒置荧光显微镜观察心肌组织荧光表达并计算转染效率,Realtime PCR方法测定miR-21表达,超声心动图观察大鼠心功能。结果冠脉注射后7 d PBS组未见绿色荧光,余各组大鼠心肌均可观察到少量绿色荧光表达,第14天达高峰,之后呈下降趋势。14 d高病毒量组较其他中、低病毒量组转染效率明显高([73.7±8.4)%vs(39.6±4.8)%,(P0.05)。结论 rAAV9-Zs-Green-pre-miR-21可以有效、持久、安全地在大鼠心肌表达。