三维微小凹图式的制备及其与C17．2神经干细胞的复合

作     者：张利光 吴泽志 宋兆全 黄岂平 廖彦剑 Li Chenzhong 

作者机构：重庆大学生物工程学院生物流变科学与技术教育部重点实验室教育部、国家外专局生物力学与组织修复学科创新引智基地重庆400044 佛罗里达国际大学生物医学工程系纳米生物工程/生物电子实验室迈阿密佛罗里达33174 

出 版 物：《生物医学工程学杂志》 (Journal of Biomedical Engineering)

年 卷 期：2012年第29卷第3期

页      面：555-562页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30870570) 重庆市科技攻关重点项目资助(CSTC2009AB5202) 

主　　题：三维 微小凹 微加工 C17.2神经干细胞 

摘      要：以紫外光光刻及氢氟酸湿法蚀刻加工硅阳模,采用基于聚二甲基硅氧烷(PDMS)的软光刻技术制备9种不同结构尺寸的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)和PMDS三维微小凹图式。PLGA及PDMS三维微小凹图式经等离子氧蚀刻和多聚赖氨酸裱衬处理后进行C17.2神经干细胞培养。随着在图式上培养时细胞的增殖,C17.2神经干细胞逐渐在微小凹中聚集,表现出明显的三维生长行为;通过羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)染色后进行激光共聚焦显微扫描与三维重构,显示大部分细胞生长于微小凹中离底面30～90μm的区间内;免疫荧光结果显示C17.2神经干细胞在三维微结构中复合培养2d后呈现均一的巢蛋白(Nestin)阳性。结论:本文设计的微小凹图式适用于C17.2神经干细胞的三维培养及后续的分化研究,细胞于微小凹图式培养过程中可以保持均一的干细胞特性。