miR-503对辐射诱导U937细胞CD40表达的调控作用

作     者：孙世龙 董娟聪 金顺子 SUN Shi-long;DONG Juan-cong;JIN Shun-zi

作者机构：吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室 长春130021 

出 版 物：《中华放射医学与防护杂志》 (Chinese Journal of Radiological Medicine and Protection)

年 卷 期：2011年第31卷第6期

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核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金面上项目 国家教育部留学同国人员启动基金项目 

主　　题：miR-503 CD40 电离辐射 肿瘤 调控 

摘      要：目的 探讨miR-503在U937细胞中与CD40的靶向关系,并观察其对辐射诱导U937细胞CD40表达的调控作用.方法 将miR-503序列插入载体pcDNA-DEST-47中构建真核表达质粒；同时构建CD40基因3’-UTR-荧光素酶报告质粒,与pcDNA-DEST-miR-503质粒共转染至U937细胞,分析miR-503对其调控作用；同时用miR-203和miR-29b作为对照,观察miR-503对CD40的靶向作用.采用Western blot方法,证实miR-503对CD40蛋白表达的抑制作用及照射后U937细胞CD40蛋白表达变化；采用Real-Time PCR方法检测5 Gy电离辐射照射后U937细胞miR-503表达量.结果 psiCHECK2-CD40和pcDNA-DEST-miR-503两种质粒共转染组的荧光素酶表达明显低于单独转染的空载体和靶基因CD40组(t=3.16,P0.05),miR-203和miR-29b不能抑制CD40荧光素酶活性,而miR-503明显抑制CD40荧光素酶活性(t=5.25,P0.01)；转染pcDNA-DEST-miR-503质粒后在U937细胞中,靶基因CD40蛋白的表达受抑制.5 Gy电离辐射照射后,U937细胞中miR-503表达量上调(t =3.63 ～17.00,P0.01),而CD40蛋白表达下降.结论 miR-503与CD40可能是靶向关系,并参与其调控作用.辐射上调人急性白血病细胞株U937细胞的miR-503的表达量,而且抑制CD40蛋白表达,说明miR-503可能参与辐射对肿瘤细胞CD40蛋白表达的调控作用.