抗乙型肝炎病毒S抗原全人单克隆抗体的制备和表位探究

作     者：佀传亚 潘少坤 凌志洋 伊春艳 邓志瑞 谢幼华 孙兵 SI Chuan- Ya;PAN Shao-Kun;LING Zhi- Yang;YI Chun- Yah;DENG Zhi-Rui;XIE You-Hua;SUN Bing

作者机构：上海大学生命科学学院上海200444 复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 中国科学院上海巴斯德研究所上海200031 中国科学院生物化学与细胞生物学研究所上海200031 

出 版 物：《中国免疫学杂志》 (Chinese Journal of Immunology)

年 卷 期：2018年第34卷第7期

页      面：1029-1033页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基　　金：国家重点基础研究发展计划(2015CB554302) 上海市2016年度"科技创新行动计划"生物医药领域产学研医合作项目(16DZ1910100)资助 

主　　题：乙型肝炎 全人单克隆抗体 单细胞RT-PCR 中和活性 抗体表位 

摘      要：目的:针对乙型肝炎病毒S蛋白,制备全人单克隆抗体,对其亲和力、中和病毒活性及抗体所结合的抗原表位进行研究。所制备的全人抗体可应用于乙肝病毒的暴露后预防,为阻断母婴传播提供治疗手段。方法:通过流式分选和单细胞RT-PCR技术获得单克隆抗体;利用间接ELISA法检测抗体结合活性,进行表位分析;Hep G2-NTCP细胞用于病毒感染,KHB乙型肝炎病毒e抗原诊断试剂盒检测细胞上清中HBe Ag的指标。结果:获得三株具有中和活性,可以结合三种乙肝病毒亚型S蛋白的抗体,其中1F2、2A1两株抗体的结合依赖于抗原蛋白的天然构象,2H2抗体的结合依赖于连续的氨基酸序列;1F2、2H2抗体结合的位置位于S蛋白胞外区第一个免疫环状区域。结论:利用单细胞RT-PCR技术成功制备了针对乙肝病毒S蛋白的抗体,其具有中和作用。抗原表位位于S蛋白胞外区的第一个免疫环状区域内。