伯氏疟原虫ANKA株抗哌喹系小鼠模型免疫学分析

作     者：黄宪希 周利民 易国辉 吴金燕 潘在用 薛伟玲 郭虹 HUANG Xian-xi;ZHOU Li-min;YI Guo-hui;WU Jin-yan;PAN Zai-yong;XUE Wei-ling;GUO Hong

作者机构：海南医学院科学实验中心海口571101 

出 版 物：《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 (Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases)

年 卷 期：2012年第30卷第1期

页      面：12-16,19页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(No.81060140) 海南省自然科学基金(No.30838) 海南省科技计划(No.081009)~~ 

主　　题：伯氏疟原虫 哌喹抗性 免疫 

摘      要：目的观察伯氏疟原虫（Plasmodium berghei，Pb）ANKA抗哌喹（PQR）系小鼠模型的免疫学特征。方法64只昆明小鼠随机分为3组，A组和C组各16只，B组32只（其中16只用于观察存活天数）。A组和B组小鼠分别经腹腔感染伯氏疟原虫ANKA株哌喹敏感系（PbPQS）和抗性系（PbPQR）红内期原虫1×10^7个（200μl血），C组（健康对照组）注射等量生理盐水。每组于感染后4、8、12和16d各取4只小鼠，取尾血制薄血膜镜检，计算红细胞原虫感染率（简称原虫率）。脱颈处死小鼠，无菌取脾制备脾淋巴细胞悬液，用CCK-8法测定各组小鼠脾淋巴细胞经刀豆球蛋白A（ConA）刺激后的增殖反应，用Griess法和ELISA分别测定脾淋巴细胞培养上清中NO含量和γ干扰素（IFN-γ）水平。另取10只昆明小鼠，每鼠腹腔接种PbPQR系原虫约1×10^7个，待原虫率上升后下降，典型的原虫转变为蓝染细胞时，腹腔感染PbPQS系原虫（1×10^6个）进行攻击感染，观察小鼠原虫率和小鼠存活情况。结果A组小鼠平均存活（9．0＋3．0）d，感染后6～12d原虫率均〉50％，出现严重贫血。感染后16d，B组小鼠全部存活，原虫率为（26．66±2．54）％。A、B两组小鼠的脾淋巴细胞经ConA刺激后增殖显著，感染后12d，分别为0．65±0．08和0．86±0．20（P〈0．01）。脾淋巴细胞培养上清中，NO含量随感染时间延长而上升，感染后12d，A、B和C组分别为（48．80±3．49）、（54．80±2．17）和（7．80±0．71）μmol／L，三者比较差异有统计学意义（P〈0．01）。A组脾淋巴细胞培养上清中IFN-γ水平随感染时间延长而上升，感染后12d达到最高，为（752．20±39．49）pg／ml，B组于感染后8d升至峰值[（855．80±33．65）pg／ml]，感染后12d降至（620．20±27．11）pg／ml；感染后8d和12d，A组和B组IFN．吖水平的差异有统计学意义（P〈0．01）。用PbPQS系攻击感染PbPQR系小鼠模型后10d，原虫率为（2．44±2．07）％，随之逐渐消失，感染后40d未检出虫体，无小鼠死亡。结论伯氏疟原虫ANKA株哌喹抗性系感染小鼠的脾淋巴细胞增殖水平、NO水平和IFN-γ含量均显著高于PbANKA株PQS系感染小鼠，可诱导小鼠产生一定保护性免疫反应。