猴D型逆转录病毒P27基因的表达、纯化及重组蛋白的鉴定
Expression,Purification and Identification of Simian Type-D Retrovirus p27 Gene作者机构:云南农业大学动物科学技术学院云南昆明650201 昆明理工大学云南昆明650224 云南出入境检验检疫局云南昆明650228
出 版 物:《中国动物检疫》 (China Animal Health Inspection)
年 卷 期:2010年第27卷第5期
页 面:31-33页
学科分类:090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学]
摘 要:根据GenBank上已发表的猴D型逆转录病毒SRV-2株基因组序列设计合成了一对特异性引物,通过PCR扩增出P27基因。将扩增出的片段克隆到原核表达载体pBAD/Thio-TOPO上,通过序列分析证实该片段与猴D型逆转录病毒SRV-2株P27基因序列一致。将阳性重组质粒转化至大肠杆菌T0P010中,用阿拉伯糖诱导表达,表达的融合蛋白进行SDS-PAGE和WesternBlot分析,并用proBondTM柱在天然状态下进行纯化。结果表明,表达的融合蛋白分子量约为50KDa,其大小与预期相符。