Ezrin上调HepG2细胞膜转运蛋白MRP2的表达
Ezrin knockdown up-regulates MRP2 protein membrane expression in HepG2 cells作者机构:第三军医大学西南医院全军消化病研究所重庆400038
出 版 物:《第三军医大学学报》 (Journal of Third Military Medical University)
年 卷 期:2015年第37卷第19期
页 面:1951-1954页
核心收录:
学科分类:1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含:心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学]
基 金:国家自然科学基金面上项目(81370560 81170430) 国家自然科学基金青年科学基金项目(81100280)~~
摘 要:目的建立Ezrin基因表达缺失的Hep G2细胞株,并研究其在胆汁淤积时对Hep G2细胞胆汁酸转运蛋白多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance-associated protein 2,MRP2)的影响。方法不同位点干扰的Ezrin-shRNA质粒转染Hep G2细胞,筛选Ezrin基因表达缺失的Hep G2细胞。分别提取细胞总蛋白和膜蛋白,检测Ezrin基因表达缺失是否影响Hep G2细胞胆汁酸转运蛋白MRP2的表达。结果 RT-q PCR结果证实,Ezrin-shRNA#3质粒转染Hep G2细胞后成功抑制了Ezrin基因表达,抑制率为70%。蛋白免疫印迹表明,Ezrin基因表达缺失后,Hep G2细胞胆汁酸转运蛋白MRP2表达增高,但与对照组相比,差异无统计学意义(P0.05)。蛋白免疫共沉淀检测生物素化MRP2膜蛋白表明,Ezrin基因表达缺失后,无论是胞浆中还是细胞膜上,MRP2膜蛋白均表达增高(P0.05)。结论 Ezrin基因表达缺失后能够上调Hep G2细胞中MRP2膜蛋白,使其表达增高。