鼠牙乳头细胞核心结合因子cDNA片段的克隆与序列测定

作     者：郭红延 吴补领 郭希民 陆怀秀 余擎 

作者机构：第四军医大学口腔医学院牙体科西安710032 

出 版 物：《第三军医大学学报》 (Journal of Third Military Medical University)

年 卷 期：2001年第23卷第11期

页      面：1309-1311页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：高等学校骨干教师资助计划资助项目 

主　　题：鼠牙乳头细胞 核心结合因子 cDNA片段 基因表达 成骨细胞转录因子 

摘      要：目的 从培养的大鼠牙乳头细胞中克隆核心结合因子 (cbfa1)的cDNA片段。方法 原代培养大鼠牙乳头细胞 ,提取培养细胞的总RNA ,逆转录合成cDNA ,用PCR的方法扩增cbfa1基因片段。将获得的预期大小的PCR产物插入pUC18克隆载体中 ,转化TOP10感受态细胞 ,蓝白筛选白色克隆 ,进行体外扩增 ,提取质粒进行酶切鉴定 ,含目的插段的克隆在PE317 A自动测序仪上进行序列测定。结果 从培养的鼠牙乳头细胞提取的总RNA中成功克隆出 6 91bpcbfa1基因片段 ,测序结果和GenBank报道序列完全一致。结论 从鼠牙乳头细胞中成功克隆到cbfa1基因片段 ,确切的证实了核心结合因子 (cbfa1)基因在鼠牙乳头细胞中的表达。