干血斑样本用于HIV抗体检测方法学优化与应用

作     者：赫晓霞 粟斌 程焕义 王月华 马仲慧 邢文革 蒋岩 HE Xiaoxia;SU Bin;CHEN Huanyi;WANG Yuehua;MA Zhonghui;XING Wenge;JIANG Yan

作者机构：中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心参比实验室北京102206 首都医科大学附属北京佑安医院临床实验室北京100069 

出 版 物：《中国艾滋病性病》 (Chinese Journal of Aids & STD)

年 卷 期：2018年第24卷第6期

页      面：536-539页

学科分类：1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 100401[医学-流行病与卫生统计学] 10[医学] 

基　　金：十三五重大专项课题(2017ZX10201101-002-003)~~ 

主　　题：艾滋病病毒 抗体检测 干血斑 洗脱条件 

摘      要：目的探讨用于干血斑样本中艾滋病病毒（HIV）抗体检测的最佳洗脱条件。方法选取并制备中值（24）与低值（26）的干血斑样本,利用HIV抗体诊断试剂盒（酶联免疫吸附试验法）,对不同洗脱温度、不同洗脱液组分、不同洗脱液体积、不同洗脱时间分别进行组合后,进行干血斑（DBS）样本洗脱液中抗体OD值测定分析,从而选出最适宜、最方便用于HIV抗体检测的DBS洗脱条件。结果室温与4℃条件下洗脱样本差异无统计学意义（P=0.979,P=0.704）;不同洗脱液体积对样本洗脱的影响差异无统计学意义（P=0.183）;洗脱液组分对低值（26）样本的洗脱效果有统计学意义（P=0.033）,其中以含0.5‰Tween20的PBS对样本洗脱的影响更为显著（P=0.02,P=0.004）;洗脱时间对中值（24）与低值（26）样本均有显著影响（P=0.00,P=0.00）,其中4小时和6小时为显著差异分界点。670份临床已知样本的检测应用中,试剂盒现成Cutoff值计算判定阳性样本时,存在2.63%的假阳性,无假阴性。结论用于DBS中HIV抗体最佳洗脱条件为：用300μL含有0.5‰Tween20的PBS在室温下（24±2℃）洗脱4～6小时。试剂盒Cutoff值不适用于DBS样本结果判定,需进一步研究设定用于该方法的Cutoff值。