丙型肝炎病毒多表位基因载体的构建与表达

作     者：邝玉 孙梦雯 杨远 马巨辉 李明远 KUANG Yu;SUN Meng-wen;YANG Yuan;MA Ju-hui;LI Ming-yuan

作者机构：四川大学基础医学与法医学院微生物学教研室四川成都610041 

出 版 物：《中国病原生物学杂志》 (Journal of Pathogen Biology)

年 卷 期：2015年第10卷第4期

页      面：293-298页

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：四川大学实验技术立项资助课题(No.0083304116008) 

主　　题：丙型肝炎病毒 多表位基因 核酸疫苗 

摘      要：目的构建编码多个丙型肝炎病毒(HCV)抗原表位的真核表达载体,建立稳定转染的细胞株,并利用小鼠移植瘤模型初步评估疫苗在动物体内的免疫反应状况。方法合成含10条CTL细胞表位的M2基因,与含多条B细胞及T细胞表位的M1基因连接合成M1M2基因;将M2、M1M2基因分别与pcDNA3.1(+)连接,构建真核表达载体pcDNA3.1(+)/M2及pcDNA3.1(+)/M1M2;将上述两种载体与pcDNA3.1(+)/M1分别转入SP2/0细胞中,并检测目的蛋白表达;用3种重组质粒分别免疫BALB/c小鼠移植瘤模型,初步评估疫苗引起的免疫反应。结果 3种真核表达载体在SP2/0细胞中均能得到稳定表达,免疫荷瘤小鼠后,小鼠瘤体的大小M1M2组M2组M1组空质粒对照组,实验组均能观察到肿瘤组织的坏死现象。结论成功构建了HCV多表位基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)/M1M2,用该表达载体免疫小鼠可引起较强的特异性免疫应答。