SATB1基因沉默抑制食管鳞状细胞癌TE-1中肿瘤干细胞样细胞侵袭及迁移能力

作     者：李晓雷 徐俊 胡欣 何文武 郑银彬 Li Xiao-lei;Xu Jun;Hu Xin;He Wen-wu;Zheng Yin-bin

作者机构：南充市中心医院.川北医学院第二临床医学院胸外科四川省南充市637000 南充市中心医院.川北医学院第二临床医学院肿瘤科四川省南充市637000 

出 版 物：《中国组织工程研究》 (Chinese Journal of Tissue Engineering Research)

年 卷 期：2018年第22卷第17期

页      面：2674-2679页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071007[理学-遗传学] 

基　　金：四川省卫生和计划生育委员会科研课题(16PJ210) 课题名称:SATB1靶向调控FN1基因对食管癌TE-1细胞侵袭迁移的影响及其分子机制研究 

主　　题：食管肿瘤 肿瘤干细胞 RNA干扰 淋巴细胞 肿瘤浸润 组织工程 食管鳞状癌 SATB1基因 细胞侵袭 细胞迁移 基质金属蛋白酶 基因沉默 Transwell小室 细胞转染 克隆形成 p75^(NTR) 

摘      要：背景:近来有研究证实SATB1与肿瘤的发生及发展有关,但其在肿瘤转移中的机制尚不明确。目的:观察特异性干扰SATB1基因表达对食管鳞状细胞癌TE-1中肿瘤干细胞样细胞侵袭、迁移的影响。方法:采用免疫磁珠分选法从人食管鳞状细胞癌TE-1中分选p75^(NTR)阳性细胞与p75^(NTR)阴性细胞,检测p75^(NTR)阳性细胞的体外增殖能力及克隆形成能力。取对数生长期的p75^(NTR)阳性肿瘤干细胞样细胞,转染组利用Lipofectamine 2000脂质体法将SATB1基因si RNA转染至细胞中,同时设置空载体转染的p75^(NTR)阳性细胞为对照,转染后72 h,采用Western blot法检测2组细胞SATB1蛋白表达,Transwell小室实验检测2组细胞的迁移及侵袭能力,Western blot与q RT-PCR法检测基质金属蛋白酶2/9的表达。结果与结论:(1)与p75^(NTR)阴性细胞比较,p75^(NTR)阳性细胞培养3,5,7 d的细胞增殖明显加快(P0.05);(2)p75^(NTR)阳性细胞的克隆形成率明显高于p75^(NTR)阴性细胞(P0.05);(3)转染后72 h后,转染组SATB1基因蛋白表达明显低于对照组(P0.05),迁移能力与侵袭能力明显低于对照组(P0.05),基质金属蛋白酶2/9的基因及蛋白表达明显低于对照组(P0.05);(4)结果提示,以si RNA干扰SATB1基因后,可抑制食管鳞状细胞癌TE-1肿瘤干细胞样细胞侵袭、迁移,可能与其下调基质金属蛋白酶2/9的表达有关。