脂肪间充质干细胞混合成骨细胞与羟基磷灰石/壳聚糖/聚乳酸复合后的体内异位成骨效应

作     者：田学涛 王显勋 王小伟 Tian Xue-tao;Wang Xian-xun;Wang Xiao-wei

作者机构：江汉大学附属医院(武汉市第六医院)创伤科湖北省武汉市430015 湖北省第三人民医院骨科湖北省武汉市430033 

出 版 物：《中国组织工程研究》 (Chinese Journal of Tissue Engineering Research)

年 卷 期：2018年第22卷第21期

页      面：3304-3309页

学科分类：0710[理学-生物学] 0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 0403[教育学-体育学] 1002[医学-临床医学] 07[理学] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 071007[理学-遗传学] 0703[理学-化学] 0836[工学-生物工程] 

基　　金：湖北省卫生计生科研项目(WJ2015MB128)~~ 

主　　题：成骨细胞 脂肪间充质干细胞 羟基磷灰石/壳聚糖/聚乳酸 干细胞 脂肪组织 间质干细胞 磷酸钙类 组织工程 

摘      要：背景:成骨细胞缺乏是骨组织工程面临的关键问题,而间充质干细胞联合成骨细胞移植能够获得理想效果。目的:观察脂肪间充质干细胞与成骨细胞复合羟基磷灰石/壳聚糖/聚乳酸支架材料在体内的异位成骨效应。方法:酶消化法和贴壁法分离原代脂肪间充质干细胞、成骨细胞,并进行鉴定。取成骨细胞、脂肪间充质干细胞、成骨细胞+脂肪间充质干细胞混合细胞(比例为1︰1),分别复合羟基磷灰石/壳聚糖/聚乳酸骨修复材料,体外复合培养48 h后,植入SD大鼠背部皮下,作为实验组,以单纯材料植入作为对照组。术后8周取出标本,进行大体观察、组织学观察并计算新骨生成率。结果与结论:(1)脂肪间充质干细胞经成脂、成软骨、成骨诱导后,油红O染色、甲苯胺蓝染色和茜素红染色均为阳性;流式细胞仪检测脂肪间充质干细胞中CD147、CD90、CD105、CD44呈阳性表达(80%),而CD117、CD34、CD31、CD45则呈阴性表达(5%);(2)第3代成骨细胞茜素红染色、碱性磷酸酶染色均为阳性;(3)植入8周后大体观察可见材料中有软组织长入,难以分离;(4)植入8周后组织学观察可见各组均有新骨形成,与其他材料组比较,脂肪间充质干细胞+成骨细胞+羟基磷灰石/壳聚糖/聚乳酸组成骨分数最高,差异有显著性意义(P0.05);(5)结果表明,脂肪间充质干细胞可促进成骨细胞复合羟基磷灰石/壳聚糖/聚乳酸支架材料的异位成骨。