β防御素2在恶性黑色素瘤B16细胞中的稳定表达及其生物学效应研究

作     者：梅寒芳 金小宝 朱家勇 Mei Hanfang;Jin Xiaobao;Zhu Jiayong

作者机构：广东药学院:广东省生物活性药物研究重点实验室广州510006 基础学院生物化学与分子生物学系广州510006 

出 版 物：《第三军医大学学报》 (Journal of Third Military Medical University)

年 卷 期：2011年第33卷第14期

页      面：1467-1470页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 1002[医学-临床医学] 07[理学] 071007[理学-遗传学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(36071832) 

主　　题：防御素 天然免疫 恶性黑色素瘤 

摘      要：目的建立稳定表达防御素mBD2的恶性黑色素瘤细胞B16-mBD2,研究mBD2对B16细胞生物学特性的影响。方法在前期构建好mBD2真核表达质粒的基础上,脂质体法转染恶性黑色素瘤B16细胞,G418筛选得到稳定表达细胞株B16-mBD2,RT-PCR和Western blot从mRNA和蛋白角度鉴定mBD2分子的表达;MTT法鉴定其生长曲线;流式细胞仪分析细胞周期分布、凋亡情况及细胞膜表面分子CD80、CD86、MHCⅠ(H-2Kd)、MHCⅡ(I-Ad)的表达。结果成功构建稳定表达mBD2的B16细胞,RT-PCR和Western blot分别从mRNA及蛋白水平验证了mBD2分子表达;稳定表达mBD2的细胞B16-mBD2与转染空载体的B16-p细胞及野生型B16细胞相比,细胞增殖明显减慢,从48 h开始,各时间点细胞活力显著降低(P0.05)。结论 mBD2明显抑制恶性黑色素瘤B16细胞的增殖,其机制可能与诱导细胞周期S期阻滞有关;mBD2对细胞凋亡率及细胞膜表面免疫分子的表达无影响。