大黄酸兔源多克隆抗血清的制备与鉴定

作     者：王咏枝 屈会化 邢洪霞 张越 成金俊 熊威 罗娟 赵琰 孔慧 王庆国 WANG Yong-zhi;QU Hui-hua;XING Hong-xia;ZHANG Yue;CHENG Jin-jun;XIONG Wei;LUO Juan;ZHAO Yan;KONG Hui;WANG Qing-guo

作者机构：北京中医药大学中药学院北京100029 北京中医药大学中医药研究院北京100029 曲阜市中医院山东曲阜273100 北京中医药大学中医学院北京100029 

出 版 物：《中国中医药信息杂志》 (Chinese Journal of Information on Traditional Chinese Medicine)

年 卷 期：2018年第25卷第5期

页      面：41-45页

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基　　金：国家自然科学基金重点项目(81430102) 

主　　题：大黄酸 人工抗原 碳二亚胺法 兔源多抗血清 酶联免疫分析 

摘      要：目的合成大黄酸人工抗原,制备敏感性高、特异性强的大黄酸兔源多克隆抗血清。方法采用碳二亚胺法制备大黄酸人工抗原,将大黄酸分别与牛血清白蛋白和卵清蛋白相偶联。用紫外扫描法鉴定大黄酸人工抗原是否偶联成功,免疫新西兰兔,制备多抗血清,通过间接竞争ELISA测定抗血清效价,通过间接竞争ELISA鉴定抗血清的敏感性和特异性,并分别用间接竞争ELISA和HPLC检测大黄中大黄酸的含量。结果 2只新西兰兔产生的多抗血清效价在1∶64 000以上,其中,2号兔多抗血清敏感性最好,半数抑制浓度为0.09 ng/mL,且具有良好的特异性。兔抗血清测得大黄中大黄酸含量为(0.026±0.001)%,HPLC测得大黄中大黄酸含量为(0.027±0.000)%。结论本研究制备了敏感性高、特异性强的大黄酸兔源多克隆抗体血清,为建立大黄酸免疫亲和色谱分析技术和快速检测方法奠定了基础。