NMDA受体在爪蟾卵母细胞和HEK-293细胞表达体系中的建立
Methods to establish Xenopus laevis oocytes and HEK-293 cells expressing NMDA receptors作者机构:广西医科大学药学院南宁530021 美国内布加斯州立大学医学中心神经科学与药理学系奥马哈ne681985880
出 版 物:《广西医科大学学报》 (Journal of Guangxi Medical University)
年 卷 期:2018年第35卷第6期
页 面:779-783页
学科分类:1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 10[医学]
基 金:国家自然科学基金资助项目(No.81360192 No.81660213) 广西自然科学基金资助项目(No.2012GXNSFCA053004 No.2017GXNSFAA198187) 广西教育厅高等学校资助科研项目(No.201203YB041)
主 题:爪蟾卵母细胞 HEK-293细胞 NMDA受体 全细胞膜片钳技术
摘 要:目的:建立特异性表达NMDA受体(NMDAR)NR2AR、NR2BR亚型的爪蟾卵母细胞和HEK-293细胞模型,选出合适的表达体系模型,为研究药物对NMDAR介导电流的影响奠定基础。方法:分别采用显微注射法和脂质体转染法将NMDAR表达在爪蟾卵母细胞和HEK-293细胞上,利用全细胞膜片钳技术,记录NMDAR亚型NR2AR、NR2BR介导的电流。结果:在建立的爪蟾卵母表达体系中,NMDAR基因注射成功率为100%,且能检测到NMDAR亚型NR2AR和NR2BR介导的内向电流,而在HEK-293表达体系中,转染成功率为(6.7±1.39)%,未检测到NMDAR介导的电流。结论:成功建立爪蟾卵母细胞NMDAR表达体系,可作为研究药物对爪蟾卵母细胞表达体系上NMDAR电流影响的合适的细胞表达体系模型。在HEK-293表达体系上未检测到相关电流,可能与其转染后细胞活性大大降低、脂质体转染效率低等因素有关。