γδT细胞体外扩增方法的建立及其抗肿瘤活性

作     者：谢蕾 陈稳 王亮 程民 胡世莲 沈干 Xie Lei;Chen Wen;Wang Liang;Cheng Min;Hu Shilian;Shen Can

作者机构：安徽医科大学附属安徽省立医院老年医学科合肥230001 安徽医科大学附属安徽省立医院肿瘤免疫与营养治疗安徽省重点实验室合肥230001 

出 版 物：《中华肿瘤杂志》 (Chinese Journal of Oncology)

年 卷 期：2018年第40卷第4期

页      面：247-251页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81471552) 安徽省重点实验室绩效项目(1606c08236) 安徽省科技攻关计划(1501041142) 

主　　题：肺肿瘤 肿瘤免疫治疗 γδT细胞 抗瘤活性 

摘      要：目的探讨建立体外培养18T细胞的方法及其体内外抗肿瘤活性及安全性。方法应用植物血凝素、唑来膦酸、白细胞介素2（IL-2）和IL-7等刺激外周血单个核细胞，在体外进行大量扩增。采用流式细胞术、体外杀伤实验和荷人肺癌小鼠模型检测18T细胞的特点和抗肿瘤活性，采用病毒检测试剂盒检测^y6T细胞中外源性因子的污染情况。结果体外培养14-16d后，16T细胞扩增总数〉1．0×10^10个，其中CD3＋γδTCR＋细胞所占比例〉90％，无细菌、真菌、支原体和病毒因子等污染。体外扩增后的18T细胞对肺鳞癌细胞SK-MES．1、卵巢癌细胞H08910、肺腺癌细胞A549和慢性髓原白血病细胞K562均具有较强的细胞毒性，杀伤效率均〉65％（效靶比为50：1）。实验组和对照组小鼠的肿瘤体积分别为（828．99±61．05）mm^3和（1723．51±84．30）mm^3，差异有统计学意义（P〈0．05）。输注18T细胞的小鼠无急性不良反应。结论培养的γδT细胞具有足够的数量、高纯度、较强的活性、良好的体内外抗肿瘤活性及安全性，对肺癌、卵巢癌和白血病肿瘤细胞具有杀伤活性。