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鹧鸪茶SRAP-PCR反应体系优化技术

Optimization Techniques for SRAP-PCR Reaction System in Mallotus oblongifolius(Miq.) Muell. Arg.

作     者:严武平 李娟玲 吴淑敏 覃少昌 杨祥飞 王钰 Yan Wuping;Li Juanling;Wu Shumin;Qin Shaochang;Yang Xiangfei;Wang Yu

作者机构:海南大学热带农林学院海口570228 

出 版 物:《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)

年 卷 期:2018年第16卷第10期

页      面:3252-3258页

核心收录:

学科分类:09[农学] 090203[农学-茶学] 0902[农学-园艺学] 

基  金:国家自然科学基金项目(31560108)资助 

主  题:鹧鸪茶 SRAP-PCR 影响因子 反应体系优化 

摘      要:为了更好地应用SRAP分子标记技术于鹧鸪茶遗传多样性研究中,本研究采用单因子试验和正交试验相结合的方法对鹧鸪茶SRAP-PCR反应体系中的主要影响因子进行优化,先利用单因素试验找到各因子的适宜浓度范围,再采用L_(160(4~4)正交表进行正交试验,按照遗传多样性分析的要求,直观分析16个试验组合间的扩增效果,从中构建出了一套重复性好、条带清晰且稳定的SRAP-PCR体系:在20μL体系中,10×PCR Buffer 2μL,Taq DNA聚合酶3 U,d NTPs 0.15 mmol/L,引物浓度0.4μmo l/L和模板DNA 40 ng。经检验,该优化体系可适用于鹧鸪茶种质资源SRAP分析的PCR反应条件和反应程序,也可应用于鹧鸪茶不同居群间的亲缘关系和遗传多样性分析。

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