SREBP2m通过胆固醇代谢损伤促进肝癌细胞增殖和迁移并抑制细胞凋亡

作     者：毛雨 胡勤 苏新良 MAO Yu;HU Qin;SU Xinliang

作者机构：重庆医科大学附属第一医院内分泌乳腺外科重庆400016 自贡市妇幼保健院检验科四川自贡643010 

出 版 物：《肿瘤》 (Tumor)

年 卷 期：2018年第38卷第4期

页      面：318-328页

核心收录：

学科分类：1204[管理学-公共管理] 1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主　　题：肝肿瘤,实验性 胆固醇调节元件结合蛋白质2 细胞增殖 细胞凋亡 细胞运动 

摘      要：目的 :研究胆固醇调节元件结合蛋白2(sterol regulatory element binding protein 2,SREBP2)过表达对正常人肝细胞LO2和肝癌细胞Hep G2胆固醇代谢以及增殖、凋亡及迁移的影响方法:应用pAd-Easy-1腺病毒载体系统构建重组腺病毒Ad-SREBP2m(SREBP2的剪切形式)以及作为对照的重组腺病毒Ad-GFP,分别感染LO2和HepG2细胞。采用胆固醇定量试剂盒检测SREBP2m过表达对细胞中总胆固醇水平的影响;蛋白质印迹法检测SREBP2m和胆固醇合成限速酶还原酶3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(3-hydroxy-3-methylglutarylcoenzyme A reductase,HMGCR)以及凋亡相关蛋白caspase 3、cleavedcaspase3和caspase 12表达的改变;分别采用EdU染色法和FCM法检测感染Ad-SREBP2m后对LO2和HepG2细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响;划痕愈合实验检测对肝癌HepG2细胞迁移能力的影响。结果:成功构建重组腺病毒Ad-SREBP2m。与Ad-GFP组相比,感染AdSREBP2m的LO2和HepG2细胞中SREBP2m和HMGCR的表达水平均明显上调,总胆固醇水平明显升高(P值均0.05),而肝癌HepG2细胞中G1期细胞所占比例明显降低,S期细胞所占比例明显升高(P值均0.001)。SREBP2m过表达对正常肝细胞LO2的增殖无影响,仅对肝癌HepG2细胞增殖具有促进作用(P0.001)。Ad-SREBP2m组LO2细胞中总caspase 3、cleaved-caspase 3和caspase 12的表达水平均明显上调(P值均0.001),而HepG2细胞中总caspase 3、cleaved-caspase 3和caspase 12蛋白的表达水平均明显下调(P值均0.05)。LO2细胞在感染腺病毒Ad-SREBP2m后凋亡率与Ad-GFP组比较升高了(11.40±0.52)%(P0.001),HepG2在感染腺病毒Ad-SREBP2m后凋亡率与Ad-GFP组比较降低了(4.17±0.47)%(P0.05);Ad-SREBP2m感染HepG2细胞48 h后,其迁移距离与Ad-GFP组相比多了(1.17±0.12)mm(P0.05)。结论:过表达SREBP2m能促进HepG2肝癌细胞增殖与迁移并抑制其凋亡;而过表达SREBP2m能促进人正常肝细胞LO2的凋亡。