应用农杆菌介导的生长点转化方法建立甜瓜遗传转化技术

作     者：郝金凤 荆培培 张丽 哈斯阿古拉 HAO Jin-feng;JING Pei-pei;ZHANG Li;HASI Agula

作者机构：内蒙古大学生命科学学院内蒙古自治区牧草与特色作物生物技术重点实验室内蒙古呼和浩特010021 

出 版 物：《华北农学报》 (Acta Agriculturae Boreali-Sinica)

年 卷 期：2014年第29卷第2期

页      面：116-120页

核心收录：

学科分类：09[农学] 0902[农学-园艺学] 090201[农学-果树学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(31101559 31360486) 教育部"春晖计划"科研合作项目(Z2005-2-01003) 

主　　题：甜瓜 植物生长点 遗传转化 农杆菌 

摘      要：为探讨甜瓜的遗传转化技术,以甜瓜品种河套蜜瓜腋芽生长点做外植体,利用庆大霉素基因作为筛选基因,对影响农杆菌转化的菌液浓度、转化时间、共培养时间进行了正交试验。通过优化转化条件,建立了农杆菌介导的甜瓜腋芽生长点遗传转化体系。结果表明,采用培养20 d的无菌苗,以腋芽作为外植体,预培养1 d;用OD600=0.7的菌液转化10 min后,黑暗中共培养2 d,然后用40 mg/L庆大霉素进行筛选;移栽后在叶片上喷洒20 mg/L庆大霉素筛选转基因植株,效果最好。通过对庆大霉素抗性苗进行PCR检测,初步验证外源基因已经整合进甜瓜基因组,转化率达到76%,幼苗移栽成活率为76.3%。