一株植物病原拮抗细菌的分离筛选及拮抗物质

作     者：陈志杰 谢江辉 陈宇丰 周登博 高祝芬 戚春林 CHEN Zhi-jie1,2, XIE Jiang-hui2 , CHEN Yu-feng1,2, ZHOU Deng-bo2, GAO Zhu- fen2, QI Chun-lin1

作者机构：海南大学热带农林学院海口570228 中国热带农业科学院热带生物技术研究所海口571101 

出 版 物：《生态学杂志》 (Chinese Journal of Ecology)

年 卷 期：2018年第37卷第5期

页      面：1595-1604页

核心收录：

学科分类：09[农学] 0904[农学-植物保护] 

基　　金：现代农业产业技术体系建设专项资金项目(CARS-32) 国家重点研发计划-香蕉化肥农药减施增效技术集成(2017YFD0202105)资助 

主　　题：芽孢杆菌 香蕉枯萎病 拮抗细菌 抑菌机理 生物防治 

摘      要：从黄豆酱中分离筛选对植物病害有防治效果的拮抗菌,提取发酵液中的拮抗物质,研究其抑菌机理及基本性质。采用稀释平板法分离细菌、平板对峙法筛选拮抗菌,通过形态特征、生理生化特征及16S rRNA鉴定菌种,硫酸铵沉淀法提取发酵液中的拮抗物质,考马斯亮蓝法测得蛋白含量,扫描电镜观察拮抗物质抑菌作用,琼脂孔扩散法测定拮抗物质抑菌谱及其活性的稳定性。从黄豆酱中分离出18株细菌,通过筛选,得到一株拮抗效果最好的菌株,菌体抑菌率62.78%,发酵液抑菌率53%,命名为4-z-3,经鉴定为Bacillus siamensis。4-z-3发酵液在硫酸铵饱和度为20%~30%时提取的粗提物抗菌活性最大,为60.8%。最适饱和度下提取的粗提物的蛋白质含量为3.45%。拮抗物质对多种病原菌有良好的拮抗效果。经过4-z-3粗提物处理的病原真菌,菌丝受到破坏,细胞形状改变,细胞完整性缺失。粗提物的稳定性方面,对热不敏感,仅在90和100℃时抑菌活性下降明显;对酸碱不敏感,pH值为4时仍有81.6%的抑菌活性;对蛋白酶不敏感,抑菌活性最低时降低了19.6%;对紫外线不敏感,照射12 h之后抑菌活性仍有92.5%。本研究表明,菌株4-z-3是一株具有发展潜力的农业生防菌,分泌的胞外拮抗物质能够有效防治多种植物病害,且抑菌活性稳定。