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小鼠胎肝细胞透明质酸3D培养体系的建立

Stem-cell Derived Functional Mouse Hepatic Organoids in Hyaluronan Hydrogels

作     者:颜洁心 王怡 王韫芳 YAN Jie-Xin,WANG Yi,WANG Yun-Fang

作者机构:广西医科大学南宁530021 北京军事科学院军事医学研究院卫生勤务与血液研究所再生医学研究室北京100039 

出 版 物:《生物化学与生物物理进展》 (Progress In Biochemistry and Biophysics)

年 卷 期:2018年第45卷第5期

页      面:567-574页

核心收录:

学科分类:0710[理学-生物学] 07[理学] 071009[理学-细胞生物学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 090102[农学-作物遗传育种] 

主  题:胎肝细胞 3D培养 透明质酸 

摘      要:为了利用透明质酸建立小鼠胎肝细胞3D培养体系,分离获得胚胎12~14d胎肝细胞,利用KM培养基进行初步2D肝干/祖细胞的筛选培养,并利用透明质酸及KM培养基配制水凝胶建立3D细胞培养体系.胎肝细胞在2D体系中呈现克隆状生长.分离培养获得的肝干/祖细胞,克隆在透明质酸建立的3D培养体系保持增殖活性,并进一步获得肝细胞功能特性,表现为3D培养上清中白蛋白合成和尿素水平显著增加.定量PCR结果显示,随着3D培养时间的延长,其肝细胞干性标志如AFP、CK19、Ep CAM、Prox1等表达水平都大幅度降低且接近成年小鼠肝脏表达水平.本研究成功建立基于透明质酸的小鼠胎肝细胞的3D无血清培养体系,并可促进小鼠胎肝细胞的肝细胞功能进一步成熟.

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