凝胶过滤层析纯化白喉类毒素工艺的优化

作     者：何岩 张明华 邓海清 段霄 李硕航 杨朝晖 刘建凯 郑海发 He Yan;Zhang Minghua;Deng Haiqing;Duan Xiao;Li Shuohang;Yang Zhaohui;Liu J iankai;Zheng Haifa.

作者机构：北京民海生物科技有限公司研发中心102600 北京民海生物科技有限公司总经理办公室102600 

出 版 物：《国际生物制品学杂志》 (International Journal of Biologicals)

年 卷 期：2018年第41卷第2期

页      面：53-57页

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

主　　题：白喉类毒素 色谱法 凝胶 研究设计 

摘      要：【摘要】目的通过定制设计优化白喉类毒素（diphtheria toxoid，DT）层析纯化工艺。方法将经硫酸铵沉淀的精制DT原液浓缩后分别用Sepharose4FF（4FF）和SephaerylS-300（S-300）凝胶过滤层析进行进一步纯化。根据定制设计，将上样体积、样品浓度、洗脱流速、层析介质设为实验因子，将层析载量、纯度、收率设为响应值，建立数学模型，确定凝胶过滤层析的最优层析参数，并对实验结果进行工艺验证。结果定制设计的实验结果显示，8-300凝胶过滤层析纯化的DT纯度和收率均高于4FF凝胶过滤层析。进一步分析确定，8-300凝胶过滤层析的最佳参数为：上样体积2．5％，样品浓度45mg／ml，洗脱流速45cm／h。当以最佳参数进行S-300凝胶过滤层析纯化时，层析工艺的验证结果符合预期。结论8-300比4FF更适宜作为DT纯化工艺的凝胶层析介质。