秦川肉牛CGI-58基因SNP位点与肉质及其启动子活性的关系

作     者：王晓宇 李安宁 桂林生 Sayed Haidar Abbas Raza 吴森 昝林森 WANG Xiaoyu;LI Anning;GUI Linsheng;SAYED Haidar Abbas Raza;WU Sen;ZAN Linsen

作者机构：西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100 国家肉牛改良中心陕西杨凌712100 现代牛业生物技术与应用国家地方联合工程研究中心陕西杨凌712100 陕西省肉牛工程技术研究中心陕西杨凌712100 

出 版 物：《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 (Journal of Northwest A&F University(Natural Science Edition))

年 卷 期：2018年第46卷第4期

页      面：13-19,27页

核心收录：

学科分类：0905[农学-畜牧学] 09[农学] 

基　　金：国家科技支撑计划项目(2015BAD03B04) 国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-38) 陕西省科技统筹创新工程计划项目(2014KTZB02-02-01) 

主　　题：CGI-58基因 秦川肉牛 启动子活性 肉品质 v-myb 

摘      要：【目的】探究秦川肉牛CGI-58基因5′-调控区中1个新单核苷酸多态(single nucleotide polymorphism,SNP)位点与肉品质的关联性,及其对该基因启动子活性的影响。【方法】选取18~24月龄的480头秦川肉牛为研究对象,测定其肌内脂肪含量、眼肌面积和背膘厚等肉品质性状指标。颈静脉采集试验牛血样,提取DNA样品,PCR扩增CGI-58基因5′-调控区,通过直接测序技术检测其单核苷酸多态性,并使用SAS(version 8.1)软件提供的一般线性模型(GLM)对单核苷酸多态位点与肉质性状进行关联分析。通过MatInspector和cMethPrimer软件分析CGI-58基因潜在的转录因子结合位点及其甲基化水平。构建含有SNP位点不同基因型的双荧光素酶报告载体,并转染小鼠3T3L-1、C2C12细胞系和牛前体脂肪细胞,测定其在3种细胞中的荧光素酶相对活性,并进行统计学分析。【结果】在秦川肉牛CGI-58基因5′-调控区发现1个新的SNP位点:g.14451079AC。g.14451079AC位点共有3种基因型:AA、CC和AC,其中AA基因型频率最高,A等位基因频率大于C等位基因频率,且AC基因型的启动子活性与眼肌面积显著高于其他基因型。g.14451079AC由A到C的突变发生在CGI-58启动子区域中一个预测的转录因子结合位点v-myb的第2个碱基A上,该突变导致启动子活性发生了显著变化,且该转录因子结合位点位于软件分析的CpG岛上。【结论】秦川肉牛CGI-58基因启动子区g.14451079AC位点的单核苷酸多态性与眼肌面积存在显著关联,且对该基因启动子活性有极显著影响。