团头鲂骨组织细胞系的建立及其生物学特性

作     者：关柠楠 兰天 陈宇龙 刘莉芳 周芬 高泽霞 GUAN Ningnan;LAN Tian;CHEN Yulong;LIU Lifang;ZHOU Fen;GAO Zexia

作者机构：华中农业大学水产学院农业部淡水生物繁育重点实验室农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室 淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心 华中农业大学水产养殖国家级实验教学示范中心 池塘健康养殖湖北省工程实验室 

出 版 物：《水产学报》 (Journal of Fisheries of China)

年 卷 期：2018年第42卷第4期

页      面：513-521页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 0830[工学-环境科学与工程（可授工学、理学、农学学位）] 0908[农学-水产] 0707[理学-海洋科学] 09[农学] 0713[理学-生态学] 

基　　金：国家自然科学基金(31472271) 武汉市青年科技晨光计划(2016070204010143) 国家大宗淡水鱼类产业技术体系建设项目(CARS-45-08) 国家级大学生创新创业训练计划(2015308200630)~~ 

主　　题：团头鲂 骨组织细胞 细胞系 基因表达 生物学特性 

摘      要：为研究鱼类骨组织细胞的特征,实验建立了团头鲂骨组织细胞的体外分离培养方法,并对其生物特性进行了鉴定。以3月龄团头鲂尾椎骨及肋骨为实验材料,利用组织块培养法和胰蛋白消化法分别进行骨组织细胞培养,确定最佳培养条件:采用组织块培养法,28°C培养,M-199培养基中加入体积分数为20%的胎牛血清、25 ng/m L表皮生长因子EGF和25 ng/m L碱性成纤维生长因子b FGF。细胞生物学特性鉴定结果显示:细胞碱性磷酸酶、钙化结节茜素红染色及矿化结节von Kossa氏法染色均呈阳性,表明所培养的细胞具有典型成骨细胞的生物学活性;鱼骨钙素ELISA试剂盒检测培养细胞中骨钙素含量为997.25 ng/L;荧光定量PCR结果显示特异性调节成骨细胞分化的转录因子runx2a、runx2b和osterix基因在团头鲂骨组织细胞系中均有表达,且runx2b和osterix的表达量显著高于团头鲂肌肉细胞系。利用本方法可获得增殖活性良好,生长速率快,且细胞生物学特性稳定的团头鲂骨组织细胞系(MBCs),为日后鱼类骨组织体外实验研究奠定了基础。