水流动力学注射对小鼠肝损伤及肝脏的自然修复作用

作     者：李胜男 张海英 孙千惠 李艳茹 葛鹤 杜瑜 王琳 LI Shengnan;ZHANG Haiying;SUN Qianhui;LI Yanru;GE He;DU Yu;WANG Lin

作者机构：吉林大学基础医学院病理学系病理生物学教育部重点实验室吉林长春130021 

出 版 物：《吉林大学学报（医学版）》 (Journal of Jilin University：Medicine Edition)

年 卷 期：2018年第44卷第2期

页      面：275-280页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100104[医学-病理学与病理生理学] 10[医学] 

基　　金：吉林省科技厅自然科学基金资助课题(201115112) 

主　　题：水流动力学注射 肝损伤 肝再生 细胞因子 生长因子 

摘      要：目的:观察水流动力学注射所致肝组织损伤的形态学特点,探讨肝脏修复的过程和机制。方法:25只雌性Balb/c小鼠在3s内经尾静脉注射大体积(1.8~2.0mL)生理盐水。根据注射后时间将小鼠分为30min组、8h组、1d组、3d组和7d组,每组5只鼠。6只未注射雌性Balb/c小鼠作为对照组。小鼠内眦静脉取血,检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平。利用苏木精-伊红(HE)染色观察各组小鼠肝脏形态学,免疫组织化学染色检测各组小鼠肝细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达情况。利用Real-time PCR法检测各组小鼠肝组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、表皮生长因子(EGF)、肝细胞生长因子(HGF)、转化生长因子α(TGF-α)、Cyclin D1、血管内皮细胞生长因子(VEGF)、Bax和Bcl-2的mRNA表达水平。结果:与对照组比较,8h组小鼠肝质量/初始体质量比值明显下降(P0.05)。与对照组比较,1d组小鼠血清中ALT水平明显升高(P0.05)。显微镜下,与对照组比较,30min组小鼠出现肝细胞肿胀及少量出血,每高倍视野下肝细胞数量明显减少(q=4.760,P0.05)。3d组小鼠坏死灶基本消失,7d组小鼠肝脏结构与对照组相似。与对照组比较,8h组和1d组小鼠肝细胞PCNA指数均明显升高(t=4.458,P0.05)。与对照组比较,30 min组小鼠胆管细胞PCNA指数明显升高(t=3.985,P0.05)。30min组TNF-α、IL-6、EGF和VEGF mRNA表达水平明显高于8h组(q=4.952,P0.05;q=14.750,P0.01;q=14.750,P0.01;q=13.551,P0.01)。3d组小鼠肝组织中HGF mRNA表达水平明显高于30min组和8h组(q=5.031,P0.05;q=4.631,P0.05),8h组和3d组小鼠肝组织中TGF-αmRNA表达水平均明显高于30 min组(q=4.592,P0.05;q=8.137,P0.01)。8h组和1d组小鼠肝组织中Cyclin D1 mRNA表达水平均明显高于7d组(q=4.736,P0.05;q=5.213,P0.05)。1d组小鼠肝组织中Bax和Bcl-2 mRNA表达水平比值明显高于30 min组(q=5.731,P0.01)。结论:水流动力学注射可引起急性肝损伤,表现为肝细胞肿胀并形成出血坏死灶。肝损伤在1周左右可自然修复,与肝再生有关的多种细胞因子和生长因子参与修复过程。