哈巴苷对急性脑缺血小鼠神经细胞及caspase非依赖性凋亡通路的影响

作     者：周炳文 楼烨亮 钟晓明 黄真 ZHOU Bing wen;LOU Ye liang;ZHONG Xiao ming;HUANG Zhen

作者机构：浙江中医药大学药学院浙江杭州310053 

出 版 物：《中国药理学通报》 (Chinese Pharmacological Bulletin)

年 卷 期：2017年第33卷第12期

页      面：1754-1761页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1002[医学-临床医学] 07[理学] 071006[理学-神经生物学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No 81573643) 浙江省自然科学基金资助项目(No LY15H280004) 

主　　题：哈巴苷 MCAO 神经细胞凋亡 线粒体膜电位 线粒体超微结构 caspase非依赖性凋亡通路 

摘      要：目的研究哈巴苷对急性脑缺血小鼠海马神经细胞、线粒体功能及caspase非依赖性细胞凋亡通路的影响。方法采用大脑中动脉阻塞法(middle cerebral artery occlusion,MCAO)复制小鼠急性脑缺血模型。造模后,各组分别立即尾静脉注射哈巴苷(4、8、12 mg·kg^(-1))、依达拉奉(3.2 mg·kg^(-1)),模型组及假手术组同法给予等量生理盐水(10 m L·kg^(-1))。造模6 h后,采用流式细胞术检测MCAO小鼠海马神经细胞凋亡率及线粒体膜电位;透射电镜观察MCAO小鼠海马神经细胞线粒体内外膜的清晰度、线粒体嵴的完整性、线粒体基质电子密度的高低变化及线粒体肿胀情况;采用Western blot法检测MCAO小鼠脑组织线粒体中AIF及Endo G的蛋白表达;采用q PCR法检测MCAO小鼠海马组织中AIF及Endo G mRNA的表达。结果造模6 h后,与假手术组相比,模型组小鼠脑组织海马神经细胞凋亡率明显增加(P0.01);海马神经细胞线粒体膜电位明显降低(P0.01);神经细胞线粒体超微结构受损严重,线粒体结构松散,可见明显肿胀;脑组织线粒体中AIF及Endo G蛋白表达明显降低,线粒体AIF及Endo G蛋白释放增加(P0.01);海马组织AIF及Endo G mRNA表达明显增加(P0.01);与模型组相比,哈巴苷各剂量组小鼠脑组织海马神经细胞凋亡率明显降低(P0.05,P0.01);海马神经细胞线粒体膜电位明显升高(P0.01);神经细胞线粒体超微结构明显改善;哈巴苷8、12 mg·kg^(-1)组小鼠脑组织线粒体中AIF及Endo G蛋白表达明显增加,线粒体AIF及Endo G蛋白释放减少(P0.05,P0.01),哈巴苷4 mg·kg^(-1)组小鼠脑组织线粒体中Endo G蛋白表达明显增加,线粒体Endo G蛋白释放明显减少(P0.05);哈巴苷8、12 mg·kg^(-1)组小鼠海马组织AIF及Endo G mRNA表达明显降低(P0.05,P0.01)。结论哈巴苷对急性脑缺血有保护作用,其机制可能与保护大脑神经细胞及线粒体生理活性,抑制caspase非依赖性细胞凋亡通路相关。