登革2型病毒E基因的表达及应用于血清学检测

作     者：张志珊 严延生 翁育伟 ZHAGN Zhi-shan;YAN Yan-sheng;WENG Yu-wei

作者机构：福建医科大学附属泉州第一医院检验科泉州362000 福建省疾病预防控制中心福州350001 

出 版 物：《中国人兽共患病学报》 (Chinese Journal of Zoonoses)

年 卷 期：2012年第28卷第5期

页      面：421-424页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：福建省社会发展重点项目(No.2010Y0010)资助 

主　　题：登革病毒 E蛋白 大肠杆菌 基因表达 

摘      要：目的利用大肠杆菌表达登革病毒2型外膜蛋白,获得重组抗原应用于血清学检测。方法用RT-PCR法扩增登革2型病毒去除C端100个氨基酸的外膜蛋白基因片段,与表达载体pET-30a连接,构建重组表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,重组蛋白用电洗脱法进行纯化。纯化的重组蛋白用间接ELISA法检测登革2型感染者血清,检测结果与间接免疫荧光法、澳大利亚Panbio试剂进行比较。结果重组质粒构建成功,经IPTG诱导后在大肠杆菌中表达重组蛋白。纯化的重组蛋白用于检测登革2型感染者血清,以IFTA作为参照标准,其敏感性为95.6%,特异性为96.8%。与澳大利亚Pan-bio IgG捕获法ELISA试剂盒检测结果相比,两种方法对登革2型IgG的检出率无统计学意义(P0.05)。结论成功通过大肠杆菌表达登革2型去除C端疏水区的外膜蛋白,重组抗原可应用于血清学检测。