鹅γ-干扰素基因真核表达载体的构建及在幼仓鼠肾细胞中的表达

作     者：胡晓静 刘棋 付薇 徐贤坤 熊毅 

作者机构：广西区动物疫病预防控制中心广西南宁530001 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2011年第41卷第5期

页      面：526-529页

核心收录：

学科分类：090602[农学-预防兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：广西科技攻关项目(桂科攻0719004-3G) 

主　　题：鹅 γ-干扰素基因 幼仓鼠肾细胞 电穿孔 真核表达 

摘      要：将克隆在pMD18-T载体中的鹅IFN-γ基因插入真核表达载体pcDNA3.1(+),得到真核表达质粒pcDNA3.1(+)-IFN-γ,经测序鉴定后,在室温条件下,质粒pcDNA3.1(+)-IFN-γ浓度20μg/mL,体积400μL,幼仓鼠肾细胞(BHK-21)细胞密度1×106/mL,电穿孔仪参数设为电压425 V、电容25μF、连续脉冲2次转染BHK-21细胞,待细胞贴壁后经过浓度为600μg/mL的G418连续筛选14 d后,出现抗性细胞克隆,将阳性BHK-21细胞上清液进行Western-blot鉴定,检测结果证明鹅IFN-γ在BHK-21细胞中得到表达。