H2O2对人皮肤成纤维细胞衰老标记蛋白30及自噬相关蛋白LC3Ⅱ表达的影响

作     者：田黎明 彭圆 胡荣毅 程杨 姜红浩 陈红英 田庆均 张翀 王平 Tian Liming;Peng Yuan;Hu Rongyi;Cheng Yang;Jiang Honghao;Chen Hongying;Tian Qingjun;Zhang Chong;Wang Ping

作者机构：湖北中医药大学附属中西医结合医院华中科技大学附属武汉中西医结合医院武汉市第一医院皮肤科武汉430022 湖北中医药大学基础医学院 

出 版 物：《中华皮肤科杂志》 (Chinese Journal of Dermatology)

年 卷 期：2017年第50卷第12期

页      面：899-903页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100206[医学-皮肤病与性病学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金 国家自然科学基金 国家自然科学基金 中国博士后科学基金 湖北省自然科学基金 湖北省自然科学基金 湖北省卫生计生委科学基金 武汉市卫生计生委科学基金 武汉市卫生计生委科学基金 武汉市中青年医学骨干人才培养工程基金 

主　　题：皮肤衰老 过氧化氢 成纤维细胞 自噬 衰老标记蛋白30 LC3Ⅱ 

摘      要：目的 探讨H2O2对人皮肤成纤维细胞（NHSF）衰老标记蛋白30（SMP30）以及细胞自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3Ⅱ型（LC3Ⅱ）的影响。方法 用150 μmol/L H2O2处理2 ~ 4代NHSF 2 h，构建细胞衰老模型作为H2O2组，而未处理的NHSF作为对照组。细胞衰老β半乳糖苷酶（SA？β？gal）染色法检测衰老细胞比例，间接免疫荧光检测自噬相关蛋白LC3的表达，反转录PCR（RT？PCR）检测SMP30 mRNA的表达，Western印迹法检测SMP30和LC3蛋白的表达。结果 H2O2组NHSF的SA？β？gal染色阳性率（41.70% ± 2.95%）显著高于对照组（3.03% ± 0.25%，t = 22.59，P 〈 0.05）。间接免疫荧光结果显示，H2O2组NHSF LC3阳性率（12.60% ± 1.57%）明显低于对照组（23.67% ± 3.04%，t = 5.61，P 〈 0.05）。Western印迹显示，H2O2组LC3Ⅰ/GAPDH比值（0.40 ± 0.02）与对照组（0.41 ± 0.04）比较差异无统计学意义（P 〉 0.05），而H2O2组LC3Ⅱ/GAPDH比值（0.20 ± 0.02）明显低于对照组（0.80 ± 0.03，t = 29.69，P 〈 0.05），且H2O2组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值（0.51 ± 0.03）亦明显低于对照组（1.98 ± 0.23，t = 10.967，P 〈 0.05）。H2O2组SMP30 mRNA和蛋白水平（与GAPDH mRNA和蛋白的比值分别为0.16 ± 0.01和0.27 ± 0.02）明显低于对照组（分别为0.35 ± 0.01和0.63 ± 0.02），均P 〈 0.05。结论 H2O2可降低NHSF中SMP30及LC3Ⅱ的表达水平，加速NHSF衰老。