沙雷氏菌(Serratia marcescens)Yj1的分离鉴定及菌体有机磷降解酶的分离纯化

作     者：于亭 王春红 张婷婷 汲添 武志海 杨美英 Yu Ting;Wang Chunhong;Zhang Tingting;Ji Tian;Wu Zhihai;Yang Meiying

作者机构：吉林农业大学长春130118 

出 版 物：《生物技术通报》 (Biotechnology Bulletin)

年 卷 期：2015年第31卷第7期

页      面：180-187页

学科分类：07[理学] 0713[理学-生态学] 

基　　金：国家自然科学基金(31201687) 

主　　题：沙雷氏菌 Yj1 乐果 大豆卵磷脂 有机磷降解酶 

摘      要：从大豆土壤中分离纯化得到一株具有卵磷脂和乐果降解能力的菌株Yj1,对该菌株进行鉴定、生长条件优化、酶活性鉴定以及有机磷降解酶的分离纯化。结果表明,Yj1与Serratia marcescens WW4(CP003959.1)的16S r DNA相似度为99%。正交试验对所需培养基进行优化,得到该菌株的最佳生长条件为甘露糖、蛋白胨和p H 8的组合。Yj1菌株在两种磷源条件下,菌株生长量均很低,但72 h内以大豆卵磷脂为磷源时的菌体生长情况优于乐果。以大豆卵磷脂为磷源时酸性磷酸酶、碱性磷酸酶与有机磷降解酶活性明显高于以乐果为磷源时的酶活,且72 h内碱性磷酸酶活性一直都高于酸性磷酸酶和有机磷降解酶。硫酸铵沉淀法结合阳离子交换层析成功从Yj1菌体中分离纯化了有机磷降解酶,SDS-PAGE结果显示纯化的蛋白为单一条带。且阳离子交换层析的提纯倍数是硫酸氨沉淀的5.303倍,硫酸氨沉淀为粗酶的1.416倍。