水稻OsZFP互作蛋白的筛选与鉴定

作     者：郑秀文 崔鹏 石嘉伟 杨静静 陈敏敏 郑瑶 许玲 刘宏波 ZHENG Xiuwen;CUI Peng;SHI Jiawei;YANG Jingjing;CHEN Minmin;ZHENG Yao;XU Ling;LIU Hongbo

作者机构：浙江农林大学农业与食品科学学院浙江杭州311300 浙江理工大学生命科学学院浙江杭州310018 

出 版 物：《浙江农林大学学报》 (Journal of Zhejiang A&F University)

年 卷 期：2017年第34卷第6期

页      面：1024-1028页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金青年基金资助项目(31301272) 浙江农林大学人才启动基金资助项目(2013FR022) 国家级大学生创新创业训练计划项目(201510341001) 浙江省高校生物学重中之重(一级)学科开放基金资助项目(2015D19) 

主　　题：植物学 水稻 调控蛋白 载体构建 酵母双杂交 蛋白互作 

摘      要：CCHC型锌指结构蛋白Os ZFP参与调控水稻Oryza sativa侧根的生长发育,但其相关互作蛋白及调控机制未知。以水稻‘日本晴’‘Nipponbare’为试验材料,克隆了Os ZFP基因,利用Eco RI和Sal I酶切位点构建酵母双杂交钓饵表达载体p GBKT7+Os ZFP,验证该表达载体对酵母菌株Y2H无毒性及报告基因自激活现象;采用酵母双杂交技术,从已构建的水稻c DNA文库中筛选到1个阳性互作蛋白,经美国国家生物技术信息中心数据库(NCBI)同源性比对,鉴定为含有T-complex polypeptide 1(TCP-1)结构域的分子伴侣蛋白第7个亚基(Os06g0687700),命名为chaperonin containing TCP-1 eta subunit(CCT-eta),进而通过酵母一对一回复验证该互作蛋白。基于CCT-eta亚基与Os ZFP蛋白互作,推测分子伴侣蛋白亚基CCT-eta可能参与调控水稻侧根的生长发育。