抑制c-Met信号通路可增加白血病细胞株对硼替佐米的化疗敏感性

作     者：严婧 何志旭 栾佐 金姣 陈晓霞 艾戎 Yan Jing;He Zhixu;Luan Zuo;Jin Jiao;Chen Xiaoxia;Ai Rong

作者机构：贵州医科大学贵阳550025 北京海军总医院北京100048 贵州医科大学附属医院贵阳550025 

出 版 物：《基因组学与应用生物学》 (Genomics and Applied Biology)

年 卷 期：2017年第36卷第10期

页      面：3956-3962页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：贵州医科大学干细胞中心实验室 贵州医科大学附属医院儿科教研室对本实验提供支持和帮助 

主　　题：白血病细胞K562 c-Met 硼替佐米 敏感性 

摘      要：本研究通过下调c-Met来观察白血病细胞株K562对抗肿瘤药物硼替佐米的敏感性,以此探索c-Met信号对白血病细胞株的增殖、凋亡等的影响,为临床上寻求治疗白血病新方案提供理论依据。本研究首先采用MTT实验初步判断硼替佐米对K562细胞的增殖能力的影响;再构建c-Met干扰载体转染K562细胞,并采用Real-time PCR检测干扰效果,筛选最适干扰质粒。然后采用筛选的c-Met干扰质粒转染细胞,分别使用MTT法检测细胞增殖能力、软琼脂克隆形成实验检测细胞克隆能力、流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果显示硼替佐米对K562细胞的增殖具有显著抑制作用(p0.05),且这种抑制作用具有浓度依赖性。c-Met干扰质粒构建及干扰效果检测实验中发现,随着转染时间的延长,绿色荧光信号越来越强,表明转染效率越来越高。但Real-time检测结果发现,3个干扰质粒中仅c-Met-Homo-1和c-Met-Homo-3干扰质粒对c-Met的表达具有明显抑制效果(p0.05),且c-Met-Homo-3干扰质粒干扰效果较好。使用c-Met-Homo-3干扰质粒转染细胞后发现,c-Met下调能够显著增强硼替佐米对K562细胞增殖的抑制作用(p0.05),且增强硼替佐米对K562细胞克隆形成的抑制能力,同时增强了硼替佐米诱导的K562细胞的凋亡。本研究结论为,下调c-Met能够增加白血病细胞株K562对硼替佐米的化疗敏感性。